本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔预先包被抗人上皮膜抗原特异性抗体。样本中的EMA抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合杂质后,加入HRP标记二抗形成稳定免疫复合物,经显色、终止反应后检测吸光度,结合标准曲线可精准检测样本中上皮膜抗原的含量。
产品参数:
产品名称 | 人上皮膜抗原(EMA)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2680 |
英文名称 | EMA ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出下限 0.073ng/mL
检测范围:0.23ng/mL~14.72ng/mL
反应时间:样本孵育 56min,二抗孵育 48min,显色 15.8min
保存条件:未开封试剂盒有效期 6 个月,2~8℃防潮储存;开封试剂 28 天内使用完毕
显色系统:单组份稳定 TMB 显色工作液
检测波长:450nm/630nm 双波长
标准曲线绘制:最小二乘法线性回归绘制标准曲线
注意事项:间叶组织来源样本本底值极低,需设置阴性对照孔排除板孔污染
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
全部试剂室温平衡 32min,稀释浓缩洗涤液;拆分酶标板条划分标准、样本、空白孔。
梯度 EMA 标准品 50μL 加入标准孔,稀释待测样本 50μL 加入样本孔,空白孔不加试剂。
各检测孔加入一步法酶结合抗体工作液 100μL,封板膜严实封口。
37℃恒温避光孵育 68min,膜抗原延长孵育时间。
洗板 4 次,每次洗涤液浸泡 35s,甩干废液后吸水纸拍净残液。
每孔加入显色混合底物 100μL,37℃避光显色 16min。
加入终止液终止反应,酶标仪 450nm 检测 OD 值,计算上皮膜抗原含量。
关键字: 人上皮膜抗原;EMA;ELISA试剂盒;
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