本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,酶标板微孔固定抗人上皮特异性抗原特异性抗体。待测样本中的ESA抗原与固相抗体特异性结合,孵育洗涤后加入酶标记检测抗体,形成夹心式免疫复合物,经底物显色、终止反应后读取吸光度,依据标准曲线完成ESA抗原的定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人上皮特异性抗原(ESA)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2679 |
英文名称 | ESA ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检测极限 0.081ng/mL
检测范围:0.26ng/mL~16.64ng/mL
反应时间:37℃夹心孵育 67min,酶结合物 54min,显色 19.2min
保存条件:试剂盒竖直放置 2~8℃,禁止倒置渗漏试剂;微孔板拆封立即使用
显色系统:临用新配双组份 TMB 显色液
检测波长:仅 450nm 波长读数
标准曲线绘制:四参数 Logistic 拟合标准曲线
注意事项:胸腹水样本离心取上清,细胞团块不可加入微孔孔道
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒组分室温放置 30min,配比稀释洗涤缓冲液;组装酶标板并做好标记。
标准品孔上样梯度稀释 ESA 标准品 50μL,样本孔加入预处理待测体液 50μL,空白孔空置。
所有加样孔加入一步法酶联检测抗体工作液 100μL,封板后轻微震荡混匀。
37℃避光孵育 64min,稳定环境避免反应偏差。
倾倒孔内废液,洗涤液加满每孔浸泡 30s,重复洗板 5 次,倒置拍干板条。
依次加入显色 A 液、B 液各 50μL,避光 37℃显色 15min。
终止液 50μL 终止显色,450nm 波长测定吸光度,对照标准曲线定量 ESA。
关键字: 人上皮特异性抗原;ESA;ELISA试剂盒;
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