本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测原理,酶标板微孔包被纯化的人神经激肽B抗原。检测体系中,样本中的NKB与固相抗原竞争结合酶标记特异性抗体,样本中NKB含量越高,结合的酶标抗体越少,显色越浅,终止反应后测定吸光度,通过标准竞争曲线精准换算样本中神经激肽B的含量。
产品参数:
产品名称 | 人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E205 |
英文名称 | NKB Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最小可测 1.7pg/mL
检测范围:4.8pg/mL~307.2pg/mL
反应时间:竞争性孵育 88min,二抗结合 68min,显色 24min
保存条件:标准品 - 20℃分装冻存,试剂盒主体 2~8℃冷藏防潮
显色系统:单组份 TMB 稳定显色液
检测波长:450nm+650nm 双波长校正
标准曲线绘制:竞争法反向四参数拟合标准曲线
注意事项:样本必须添加广谱蛋白酶抑制剂,内源肽酶会快速降解神经激肽 B
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
全部试剂室温放置 29min,稀释浓缩洗涤缓冲液;取出包被板条标记孔位信息。
梯度 NKB 标准品 50μL 加入标准孔,待测稀释样本 50μL 加入样本孔,空白孔空置。
加样孔加入一步法酶联特异性抗体工作液 100μL,封板严实密封。
37℃恒温避光孵育 58min,小分子神经肽缩短基础孵育时间。
倾倒废液,洗涤液洗板 5 次,每次浸泡 33s,反复拍干板条水分。
依次添加显色底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 14min。
终止液终止显色反应,450nm 测 OD 值,依据标准曲线计算神经激肽 B 浓度。
关键字: 人神经激肽B;NKB;ELISA试剂盒;
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