本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将特异性人神经降压素(NT)抗体包被于微孔板固相载体上，加入待测样本、标准品后，样本中的NT抗原与包被抗体特异性结合，再加入酶标记二抗形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，充分孵育洗涤去除未结合物质后，加入底物液进行显色反应，在酶的催化下底物生成有色产物，最后加入终止液终止反应，通过酶标仪测定特定波长下的吸光度值，吸光度值与样本中NT含量呈正相关，依据标准品曲线即可精准计算出样本中人NT的浓度。
产品参数：
产品名称 | 人神经降压素(NT)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E204 |
英文名称 | NT Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度：最低可检出 2.8pg/mL
检测范围：15pg/mL ~ 960pg/mL
反应时间：样本孵育 65min，二抗结合 50min，底物显色 18min，总时长约 2h13min
保存条件：未拆封试剂盒 2~8℃避光储存；开封后板条密封防潮 2~8℃可存 15d，浓缩试剂 - 20℃分装冻存
显色系统：TMB 单组分显色液，硫酸终止显色反应
检测波长：主波长 450nm，参比波长 630nm
标准曲线绘制：采用五参数 Logistic 拟合，设置 7 个梯度标准品浓度点，扣除空白孔 OD 值后拟合曲线
注意事项：NT 易被蛋白酶降解，血清样本采集后 30min 内分离分装冻存；避免反复冻融样本超过 2 次
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程：
样本与试剂盒室温平衡 30min，配制洗涤液、酶结合工作液、NT 标准品梯度稀释液，取出所需板条，剩余板条密封冷藏保存。
设空白孔、标准品孔、待测样本孔，标准品孔每孔加入 50μL 梯度稀释 NT 标准液，待测孔加 40μL 样本稀释液 + 10μL 待测样本，空白孔不加液体。
除空白孔外所有孔加入 100μL 酶标记 NT 抗体工作液，封板膜封板，37℃恒温孵育 60min。
撕去封板膜，弃去孔内液体，每孔加满洗涤液静置 30s 后甩干，重复洗板 5 次，拍干微孔板残留液体。
每孔依次加入显色剂 A 液 50μL、显色剂 B 液 50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15min。
每孔快速加入 50μL 终止液终止酶促显色反应，溶液由蓝变黄。
酶标仪 450nm 波长测定各孔 OD 值，根据标准品浓度与对应 OD 值绘制标准曲线，计算样本中 NT 含量。
关键字： 人神经降压素;NT;ELISA试剂盒;
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