本试剂盒以双抗体夹心ELISA法为核心检测原理，微孔板固相载体包被人NCAM-L1/CD171特异性抗体，实验过程中，样本及标准品中的NCAM-L1抗原与固相抗体发生特异性结合，孵育结束洗涤后，加入对应的酶标记二抗结合抗原，形成固相免疫复合物，去除未结合组分后加入显色底物发生酶促显色反应，终止反应后测定吸光度，样本吸光度值与NCAM-L1/CD171含量呈线性正相关，据此可定量分析样本中该靶标的浓度。
产品参数：
产品名称 | 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E051 |
英文名称 | NCAM-L1 Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度：最小检出值 0.32ng/mL
检测范围：2ng/mL ~ 850ng/mL
反应时间：固相结合孵育 80min，二抗温育 55min，底物显色 15min，合计 2h30min
保存条件：未开启 2-8℃避光；已拆板条放入密封袋加干燥剂 2~8℃，浓缩洗涤液室温存放即可
显色系统：单瓶即用型 TMB 显色液，1N 硫酸终止
检测波长：仅 450nm 波长读取吸光度
标准曲线绘制：半对数坐标法绘制标准曲线，7 个标准品稀释梯度
注意事项：细胞上清样本需过滤去除细胞残渣；所有稀释液现配现用，不可隔夜留存
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程：
试剂盒试剂室温平衡 20min，稀释浓缩洗涤液，逐级稀释 NCAM-L1 标准品，划分空白、标品、样本三类孔位。
标准品孔加入 50μL 梯度标准液；样本孔添加 50μL 稀释缓冲液后再加 10μL 待测样本；空白孔不加试剂。
除空白孔外每孔加入酶标记 NCAM-L1 一抗工作液 100μL，封板后 37℃孵育 65min。
弃净孔内液体，洗涤液加满每孔，静置 30s 甩干，连续洗板 5 次，彻底拍干微孔板。
每孔加入显色液 A、B 各 50μL，混匀后 37℃避光显色 16min。
加入 50μL 终止液终止反应，混匀微孔板。
酶标仪 450nm 测 OD 值，绘制标准曲线，计算样本 NCAM-L1 含量。
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