本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,固相微孔板包被人酸性磷酸酶(ACP)特异性抗体,样本与标准品中的ACP抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗涤纯化体系后加入酶标记二抗,构建稳定的免疫夹心复合物,经酶促显色、终止反应后检测吸光度,数值与样本中ACP浓度成正比,结合标准曲线完成定量检测。
基本参数:

产品名称:人酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒
英文名称:ACP Elisa Kit
货号:Y-E997
规格:48T/96T
灵敏度:最小检出 0.03U/L
检测范围:0.15U/L ~ 18U/L
反应时间:样本孵育 70min,酶结合物 51min,底物显色 17min,总时长 2h18min
保存条件:试剂盒主体 2~8℃避光,包被板严禁冷冻,洗涤液室温储存
显色系统:单组分 TMB 显色液,强酸终止液终止
检测波长:仅 450nm 波长检测
标准曲线绘制:活性单位梯度稀释,四参数拟合曲线,8 个梯度点
注意事项:前列腺组织样本 ACP 活性偏高;样本不可反复冻融,酶蛋白易失活
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒组分室温回温 30min,稀释浓缩洗涤液,梯度稀释 ACP 标准品,区分空白、标品、样本三类孔。
标准品孔加入 50μL 梯度 ACP 标准液;样本孔加 50μL 稀释液 + 10μL 样本;空白孔无加样。
检测孔加入酶标记抗 ACP 抗体 100μL,封板 37℃孵育 62min。
弃液后洗涤液加满每孔静置 30s,甩干洗板 5 次,微孔板拍干。
显色双液各 50μL 混匀添加,避光显色 16min。
加入终止液 50μL 终止并混匀显色。
450nm 测 OD 值,标准曲线计算 ACP 酶活力对应浓度。
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