本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理，微孔板包被人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)特异性抗体，待测样本中的HPRI抗原与固相抗体特异性结合，结合标准品梯度孵育后，洗涤去除未结合组分，加入酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物，显色终止后测定吸光度，数值高低对应样本中HPRI的含量，可精准定量检测。
基本参数：
产品名称：人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA试剂盒
英文名称：HPRI ELISA Kit
货号：Y-E2716
规格：48T/96T
灵敏度：检出下限 5.8pg/mL
检测范围：33pg/mL ~ 1280pg/mL
反应时间：样本孵育 74min，二抗温育 50min，底物显色 19min，合计 2h23min
保存条件：未拆封试剂盒 2～8℃，浓缩试剂分装冻存可延长有效期，开封后尽快使用
显色系统：预装 TMB 显色底物，强酸终止液终止
检测波长：450nm 主波长，650nm 参比波长
标准曲线绘制：半对数线性拟合，8 个标准品稀释梯度
注意事项：样本中 RNase 会降解靶标蛋白，采样后立即添加蛋白酶抑制剂；避免核酸污染试剂
实验前准备工作：
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释：
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。
待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：
试剂盒组分室温回温 27min，稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 HPRI 标准品，区分各类检测孔。
标准品孔加入 50μL 梯度 HPRI 标准液；样本孔加 50μL 稀释液 + 10μL 样本；空白孔无加样。
检测孔加入酶标记抗 HPRI 抗体 100μL，封板 37℃孵育 60min。
弃液后洗涤液浸泡每孔 32s 甩干，循环洗板 5 次，板条拍干。
显色双液各 50μL 混匀添加，避光显色 15min。
加入终止液 50μL 终止并混匀酶促反应。
450nm 测定吸光度，绘制标准曲线计算 HPRI 含量。
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