本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，微孔板预先包被人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)特异性抗体，加入待测样本与梯度标准品，样本中的PPI抗原与固相抗体特异性结合，洗涤纯化体系后加入酶标记检测抗体，形成稳定免疫夹心复合物，底物显色终止后检测吸光度，吸光度值与样本中PPI含量呈正相关，结合标准曲线实现精准定量检测。
基本参数：
产品名称：人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒
英文名称：PPI Elisa Kit
货号：Y-E964
规格：48T/96T
灵敏度：最小检出 3.7pg/mL
检测范围：21pg/mL ~ 840pg/mL
反应时间：样本孵育 84min，酶标记二抗 52min，避光显色 22min，合计 2h38min
保存条件：试剂盒 2~8℃避光存放，底物液严禁光照直射，洗涤液结晶温水化开即可
显色系统：双组份 TMB 混合显色体系，2mol/L 硫酸终止反应
检测波长：450nm+630nm 双波长校正读数
标准曲线绘制：四参数 Logistic 拟合标准曲线，8 个标准稀释梯度
注意事项：细胞凋亡释放大量 PPI，坏死上清样本必须梯度稀释；加样防止孔间溢液串孔
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温复温 30min，稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 PPI 标准品，取用实验专用酶标板条。
标准孔加入 50μL 梯度 PPI 标准液；样本孔加 49μL 稀释液 + 11μL 待测样本；空白孔无加样。
检测孔加入酶标记特异性抗 PPI 抗体 100μL，封板 37℃孵育 64min。
弃去孔内液体，洗涤液浸泡每孔 35s 甩干，循环洗板 5 次，板条充分拍干残留液体。
显色 A、B 液各 50μL 混匀加入每孔，37℃避光显色 17min。
加入终止液 50μL 混匀终止反应。
酶标仪 450nm 测定吸光度，拟合标准曲线计算 PPI 蛋白浓度。
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