本试剂盒基于双夹心ELISA免疫检测原理,固相酶标板包被人iNV特异性抗体,可特异性结合待测样本中的套膜蛋白,孵育结合后洗板去除未结合杂质,加入酶标记二抗形成完整免疫复合物,经二次洗涤去除游离标记物,加入显色底物发生酶促显色反应,显色深浅与样本中iNV含量呈正相关,通过吸光度检测与标准曲线比对,实现样本套膜蛋白的定量检测。
基本参数:

产品名称:人套膜蛋白(iNV)ELISA试剂盒
英文名称:iNV ELISA Kit
货号:Y-E3501
规格:48T/96T
灵敏度:检出下限 0.055ng/mL
检测范围:0.1~7.8ng/mL
反应时间:室温振荡孵育样本 70min,二抗 48min,显色 17min
保存条件:未拆封试剂盒 2~8℃;已稀释工作液不可冷藏重复使用
显色系统:即用型单一 TMB 显色液
检测波长:450nm 读数,600nm 参比
标准曲线绘制:手动拟合曲线,R² 大于 0.99 方可判定有效
注意事项:整板操作需同步加样,前后加样时差不宜超过 10min
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温静置 25min,取出 iNV 抗体包被微孔板,弃去孔中液体,洗板 2 遍后倒扣拍干。
划分孔位:空白对照、梯度标准品、待测样本;标准品孔加入 iNV 标准品稀释液 55μL,样本孔加入组织裂解稀释样本 55μL,空白孔补稀释液。
每孔加入 HRP 标记检测抗体 55μL,封板密封,37℃孵育 62min。
去除封板膜,倒掉孔内反应液,洗涤液浸泡每孔 35s 弃液,洗板 4 次,拍干微孔。
每孔加入显色底物混合液 100μL,遮光 37℃显色 19min。
滴加终止液 50μL,轻微晃动酶标板终止显色。
450nm 波长检测吸光度,标准曲线换算样本套膜蛋白含量。
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