本试剂盒采用双夹心ELISA检测原理,将高亲和力的人AZU特异性抗体包被于酶标板,样本中的天青杀素抗原可与固相抗体特异性结合,孵育洗涤后加入酶标记配对二抗,形成抗体-抗原-酶标抗体三元复合物,充分反应后洗除游离标记物,加入底物显色,显色深浅与样本AZU含量正相关,通过吸光度检测和标准曲线分析,实现天青杀素的定量检测。
基本参数:

产品名称:人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒
英文名称:AZU Elisa Kit
货号:Y-E975
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 0.07ng/mL
检测范围:0.14~10.5ng/mL
反应时间:37℃静置孵育 85min,二抗 52min,避光显色 16min
保存条件:板条分装密封带干燥剂 2~8℃,其余试剂同温保存
显色系统:A、B 液分开配制混合后显色
检测波长:450nm 主波长,650nm 扣除背景
标准曲线绘制:四参数 Logistic 拟合,基线自动归零处理
注意事项:洗板后务必彻底拍干孔内残液,防止稀释后续试剂
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 32min,AZU 抗体包被板去除孔内保存液,洗板 2 次后倒扣拍干微孔。
区分空白、标准、样本孔位;标准品孔加入倍比稀释 AZU 标准品 50μL,样本孔加入粒细胞提取稀释样本 50μL,空白孔加稀释液。
每孔加入 HRP 检测抗体 50μL,封板密封,37℃恒温孵育 60min。
弃去孔内反应液,洗涤液浸泡每孔 35s 弃除,洗板 4 次,拍干残留洗液。
加入显色 A、B 液各 50μL,避光 37℃显色 18min。
滴加终止液 50μL,震荡混匀终止显色。
450nm 读取吸光值,标准曲线计算天青杀素浓度。
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