本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,酶标板微孔预先包被抗人杀菌肽B特异性抗体。待测样本中的CecB抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除游离杂质后,加入酶标记二抗孵育结合,形成固相免疫复合物,经显色、终止反应后测定吸光度,依据标准曲线定量检测样本中杀菌肽B的浓度。
产品参数:
产品名称 | 人杀菌肽B(CecB)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2974 |
英文名称 | CecB ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出下限 1.5pg/mL
检测范围:4.2pg/mL~268.8pg/mL
反应时间:室温孵育 74min,37℃二抗 61min,避光显色 22min
保存条件:多肽类标准品分装 - 20℃冻存,试剂盒主体 2~8℃避光
显色系统:一体式预制 TMB 显色工作液
检测波长:450nm 主波长,650nm 参比
标准曲线绘制:竞争法反向四参数 Logistic 拟合曲线
注意事项:抗菌肽易被蛋白酶降解,样本采集后立即添加蛋白酶抑制剂
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
全部试剂室温平衡 30min,稀释浓缩洗涤液;固定酶标板框架标注孔位信息。
梯度 CecB 标准品 50μL 加入标准孔,稀释待测样本 50μL 加入样本孔,空白孔不加试剂。
各检测孔加入一步法酶联抗体工作液 100μL,封板后轻微震荡混匀。
37℃恒温避光孵育 60min,小分子肽类稳定孵育时长。
倾倒孔内废液,洗涤液洗板 4 次,每次浸泡 36s,吸水纸吸干残液。
每孔添加显色混合底物 100μL,37℃避光显色 14min。
加入终止液 50μL,酶标仪 450nm 读数,对照标准曲线定量杀菌肽 B 浓度。
关键字: 人杀菌肽B;CecB;ELISA试剂盒;
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