本试剂盒依托双夹心酶联免疫吸附原理,酶标板微孔固定抗人MTF特异性抗体,可特异性捕获待测样本中的微量转铁蛋白,孵育结合后洗涤去除体系杂蛋白,加入酶标记配对二抗形成稳定的抗体-抗原-酶标抗体复合物,洗板后加入显色底物进行酶促显色,显色深浅与MTF含量正相关,通过吸光度检测与标准曲线比对,实现微量转铁蛋白的精准定量。
基本参数:

产品名称:人微量转铁蛋白(MTF)ELISA试剂盒
英文名称:MTF Elisa Kit
货号:Y-E313
规格:48T/96T
灵敏度:≤0.2mg/L
检测范围:0.4~150mg/L
反应时间:样本孵育 58min,二抗 39min,显色 12min
保存条件:试剂盒 2~8℃避光,洗涤液可室温稀释配制
显色系统:经典 HRP-TMB 显色,硫酸终止
检测波长:450nm 主波长,600nm 参比
标准曲线绘制:线性回归绘制标准曲线,适用于尿液微量样本换算
注意事项:尿液样本需过滤杂质,浑浊样本必须离心预处理
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 35min,MTF 捕获抗体包被板去除孔内封存液,洗板 1 次后拍干微孔。
设定空白孔、梯度标准品孔、尿液稀释样本孔;标准品孔加入 MTF 标准品 60μL,样本孔加入预处理尿液样本 60μL,空白孔添加稀释缓冲液。
每孔加入 HRP 标记二抗 60μL,封板膜封闭,37℃湿盒孵育 70min。
去除封板,倾倒孔内液体,洗涤液浸泡每孔 35s 弃除,洗板 5 次,充分拍干。
配制显色工作液每孔加 100μL,室温避光显色 18min。
每孔加注终止液 50μL,轻摇板体终止反应。
450nm 读取吸光度,拟合曲线测定微量转铁蛋白含量。
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