本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，把抗人cytb561特异性单克隆抗体固定于微孔板表面作为固相载体，加入梯度浓度标准品及待测生物样本，样本内的cytb561抗原可与固相抗体发生特异性免疫结合，孵育结合后洗除孔内未结合物质，加入HRP标记的cytb561检测抗体，形成特异性免疫复合物，经二次洗涤后加入底物液催化显色，终止显色反应后检测各孔OD值，依据标准品浓度与对应OD值绘制标准曲线，精准测算出待测样本中cytb561的含量。
基本参数：
产品名称：人细胞色素b561(cytb561)ELISA试剂盒
英文名称：LCN2 Elisa Kit
货号：Y-E773
规格：48T/96T
灵敏度：检出下限 0.08ng/mL
检测范围：0.125-8ng/mL
反应时间：一抗结合 60min，洗板 5 次，酶标二抗温育 45min，避光显色 12min 即刻终止
保存条件：试剂盒整体 2～8℃储存，严禁冷冻；浓缩洗涤液低温出现结晶可温水化开正常使用
显色系统：单一稳定型 TMB 显色工作液
检测波长：单波长 450nm 直接测定
标准曲线绘制：横坐标标准品梯度浓度，纵坐标 OD 值，线性回归拟合标准曲线计算样本浓度
注意事项：样本需新鲜制备，反复冻融 3 次以上 cytb561 蛋白降解，检测结果显著偏低
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂盒常温放置 25min 复温，配制一步法酶标抗原混合液，排布空白、标品、样本孔。
各孔先添加酶促工作液 60μL，标准品孔加不同浓度 cytb561 标准品 40μL，样品孔加待测上清 40μL，空白孔加样本稀释液 40μL。
覆膜封板，37℃水浴孵育 55min，结束后甩净孔中液体，手动洗板 4 次，每回注满洗涤液静置 25s，吸水纸拍干。
每孔单加 TMB 显色液 100μL，微孔板轻晃混匀。
室温避光避光反应 12min，观察颜色梯度区分标品浓度层级。
即刻每孔滴加终止液 50μL，终止酶促显色反应。
酶标仪调至 450nm 读吸光度，拟合标准曲线换算样本 cytb561 含量。
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