本试剂盒采用成熟的荧光PCR扩增原理,针对牛疱疹病毒保守核酸序列设计专属扩增体系,可对牛各类组织、分泌物、体液样本中的牛疱疹病毒进行快速定性检测。试剂盒操作简便、检测周期短,无需复杂样本预处理,兼具高特异性与高灵敏度,可精准检出低载量病毒隐性感染样本。主要应用于牛疱疹病毒感染的临床诊断、养殖源头疫病筛查、进出口牛只检疫及疫病流行趋势监测,助力规模化牛场病毒性疫病常态化防控。
产品名称 | 牛疱疹病毒型PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P013933 |
英文名称 | Bovine Hepervirus 1 (BHV1)1PCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:

针对牛疱疹病毒糖蛋白 gB 保守 DNA 序列设计上下游特异性引物,常规 PCR 扩增后凝胶电泳,出现预期大小条带即为病毒核酸阳性。
荧光定量 Taqman 探针 PCR,扩增病毒即刻早期基因,扩增每循环释放荧光,通过 Ct 阈值快速定量牛疱疹病毒载量。
磁珠法提纯组织样本病毒 DNA,等温预扩增结合普通 PCR,低病毒载量样本也可高效检出,适配病牛脏器、分泌物多种检测样本。
操作步骤:

1. DNA提取(样本制备区)
使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
2. 标准曲线制备(独立操作区)
标记6管为梯度稀释点(如7-2),每管加45 μL DEPC水。
取5 μL阳性对照依次稀释,混匀后作为标准品(避免污染)。
3. PCR反应体系配制(试剂配制区)
按以下比例配制(示例):
| 组分 | 体积(μL) |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上机检测
程序设置:预变性95℃ 3 min;40循环(95℃ 10 s, 60℃ 30 s);熔解曲线分析。
数据分析:根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。
注意事项:

1、实验分区管理
实验全程需严格划分三个独立区域:试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区,各区实验服、移液器及耗材严禁混用,防止交叉污染。
2、防止污染操作
使用带滤芯枪头,每步更换枪头;
阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行,避免污染其他试剂;
加样后立即盖紧管盖,避免气溶胶扩散。
3、试剂保存与使用
所有试剂需-20℃避光保存,避免反复冻融,确保稳定性;
使用前于冰上解冻并轻柔混匀,瞬时离心后使用。
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