β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)测试盒
产品介绍:
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
测定原理:
β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
产品名称 | β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 糖代谢系列 |
货号 | YSH3241 |
检测原理:
昆布多糖‑DNS 还原糖法:以昆布多糖 (β‑1,3‑葡聚糖) 为底物;酶水解产生还原糖,DNS 沸水显色,540 nm 终点比色。
p‑NP‑β‑D‑葡糖苷底物比色法:人工合成显色底物被水解释放 p‑NP,405 nm 测酶活。
荧光标记昆布多糖淬灭恢复法:荧光‑淬灭双标记 β‑1,3‑葡聚糖,酶切后荧光恢复,荧光强度定量活性。
葡萄糖氧化酶偶联紫外法:水解生成葡萄糖,偶联 GOD‑POD 反应生成有色产物,510 nm 读数。
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操作步骤:
操作仪器预热:将可见分光光度计预热30min,调节波长至540nm,用蒸馏水调零标准曲线绘制:
取6支具塞刻度试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液(10mg/mL)
用蒸馏水补至1.0mL,再加入2.0mL显色工作液,沸水浴5min
立即用流水冷却至室温,定容至25mL,摇匀后测定540nm处吸光值
以葡萄糖浓度(mg/mL)为横坐标,吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定:
试剂名称(μL) 空白管 测定管
提取液/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
混匀后37℃水浴30min,立即加入2.0mL显色工作液,沸水浴5min
流水冷却至室温,定容至25mL,摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定
关键字: β1,3葡聚糖酶;β1,3GA;测试盒;
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