靶标信息
靶蛋白:B‑cell lymphoma‑2(Bcl‑2)
蛋白功能:抗凋亡蛋白,定位于线粒体外膜,抑制细胞凋亡;参与细胞存活、肿瘤发生发展。
蛋白分子量:约 26 kDa
抗体基本参数
1. 来源:兔多克隆 / 兔单克隆 / 小鼠单克隆(依亚型不同)
2. 亚型:IgG
3. 免疫原:重组人 Bcl‑2 全长蛋白 / Bcl‑2 多肽片段
4. 种属反应性:人、小鼠、大鼠
5. 纯化方式:抗原亲和纯化
6. 缓冲液组分:PBS,含稳定剂,部分叠氮钠防腐
7. 储存条件:‑20℃保存;避免反复冻融;分装使用;加入 50% 甘油可‑20℃长期保存。
推荐实验及工作稀释比例
| 实验方法 | 推荐稀释范围 |
| --- | --- |
| WB 蛋白免疫印迹 | 1:500‑1:2000 |
| ICC‑IF 细胞免疫荧光 | 1:100‑1:500 |
| IHC‑P 石蜡组织免疫组化 | 1:100‑1:400 |
| IHC‑F 冰冻组织免疫组化 | 1:200‑1:800 |
| IP 免疫沉淀 | 1:50‑1:200 |
实验操作要点
#WB
1. 预期目的条带:26 kDa。
2. 样本:总细胞裂解液、组织裂解样本均可;建议设置 Bcl‑2 高表达与敲低 / 敲除样本作为特异性对照。
3. 封闭:5% 脱脂奶粉或 BSA 封闭 1‑2 h;一抗 4℃孵育过夜。
#免疫荧光 ICC‑IF
1. 蛋白主要定位:线粒体外膜,可与线粒体标记物共定位。
2. 细胞固定:4% 多聚甲醛固定;0.1‑0.2% Triton‑X‑100 通透处理。
3. 一抗室温 2 h 或 4℃过夜孵育。
#免疫组化 IHC
1. 石蜡切片需要抗原修复(柠檬酸盐缓冲液高温修复)。
2. 内源性过氧化物酶灭活。
3. 建议设置阳性、阴性组织对照。
注意事项
1. 本产品仅用于科学研究,严禁临床体内、体外诊断使用。
2. 含叠氮钠版本不要直接接触铜、铅金属管路。
3. 反复冻融会造成抗体活性下降,收到后建议分装保存。
4. 不同样本体系最佳稀释比例需要使用者自行梯度摸索。
5. 建议搭配阳性对照(Bcl‑2 高表达细胞 / 组织)、阴性对照(敲低 / 敲除样本)验证抗体特异性。
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关键字: BCL-2抗体;
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