简介
吐温-65（聚氧乙烯山梨糖醇酐三硬脂酸酯）作为食品级表面活性剂，可通过降低油 - 水界面张力，改善油 - 甘油体系的均一性，减少传质阻力。Tween 65可以维持酶催化环境稳定性。其加入可使体系从油 - 水两相分离状态转变为均匀分散体系，同时保护Lipozyme TL IM的硅胶载体结构，减少因甘油过量导致的酶载体团聚，为酶催化提供稳定的微环境。
吐温-65
催化鱼油甘油解反应
在吐温-65存在的体系中，二酰甘油（DAG）最高产量可达 20.76wt%（最优条件：油：甘油摩尔比 1:0.5、酶载量 25wt%、40℃、反应 6h），而无 Tween 65 的体系最高DAG产量仅为 13.76wt%，提升幅度达 50.9%。Tween 65 通过改善油水相容性，有效消除了传质限制，使 Lipozyme TL IM 的催化活性得以充分发挥。
产品酸值
因反应条件温和（40℃），且吐温-65无氧化促进作用，鱼油中 EPA（13.34wt%）与 DHA（13.34wt%）的结构未被破坏，最终 DAG 产物仍富含这两种功能性脂肪酸。反应后体系酸值为 1.211g 油酸 /g，低于巴西 ANVISA（国家卫生监督局）规定的鱼油添加剂酸值上限（2.8g 油酸 /g），满足食品与医药领域的应用要求。
添加量的影响
吐温-65添加量（5-15wt%）在实验范围内对DAG产量无显著影响（p>0.05），仅需 5wt% 的添加量即可达到最佳辅助效果。这一特性不仅降低了原料成本，还避免了高浓度表面活性剂可能导致的酶活性抑制或产物分离困难，体现了经济性与实用性。
保护酶载体机制
吐温-65的疏水链与鱼油相的相互作用，可减少甘油与硅胶载体的直接接触，避免载体过度吸水；分散均匀的体系可降低局部甘油浓度，防止因甘油过量导致的酶载体团聚，维持酶的活性构象。吐温-65分子兼具亲水性聚氧乙烯链（亲水基团）与疏水性山梨糖醇酐三硬脂酸酯链（疏水基团），可自发吸附于鱼油 - 甘油的两相界面，通过亲水基团朝向甘油相、疏水基团朝向鱼油相的定向排列，显著降低界面张力。这种界面行为使原本分离的油相和水相形成均匀分散的乳浊液，增加了Lipozyme TL IM与底物（TAG、甘油）的接触面积，从根本上解决了传质阻力大的问题[1]。
参考文献
[1]M F S B M ,S J S ,C M M F , et al.Optimization of diacylglycerol production by glycerolysis of fish oil catalyzed by Lipozyme TL IM with Tween 65.[J].Bioprocess and biosystems engineering,2015,38(12):2379-88.