人B-细胞淋巴瘤因子2(BCL2)ELISA检测试剂盒的检测原理与操作注意

2025/9/8 9:28:00 作者:电离式

介绍

人B-细胞淋巴瘤因子2(BCL2)ELISA检测试剂盒是一款用于定量检测人源生物样本中抗凋亡蛋白BCL2含量的标准化试剂组合,广泛应用于肿瘤学(如淋巴瘤、乳腺癌、肺癌等BCL2高表达肿瘤研究)、细胞凋亡机制探索及临床转化医学研究,可检测血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液(贴壁/悬浮细胞)等样本类型。

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人B-细胞淋巴瘤因子2(BCL2)ELISA检测试剂盒

检测原理

人B-细胞淋巴瘤因子2(BCL2)ELISA检测试剂盒的检测原理为双抗体夹心法,酶标板预先包被高特异性抗人BCL2单克隆捕获抗体,加入样本或标准品后,BCL2与捕获抗体特异性结合;清洗去除未结合成分,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人BCL2检测抗体,形成“捕获抗体-BCL2-酶标检测抗体”三明治复合物;后续加四甲基联苯胺(TMB)底物,HRP催化其显蓝色,加稀硫酸终止液后转为黄色,通过酶标仪在450nm波长测吸光度(OD值),颜色深浅与样本中BCL2浓度呈正相关,结合标准曲线即可计算实际浓度。 该试剂盒性能优异:灵敏度可达15pg/mL,能精准检测低表达样本;特异性强,仅与BCL2结合,不与BCL2家族其他成员(如BCL-XL、BAX、MCL-1)发生交叉反应;重复性稳定,批内变异系数(CV)≤7%、批间变异系数(CV)≤10%,回收率维持在88%-112%[1]。

操作注意

人B-细胞淋巴瘤因子2(BCL2)ELISA检测试剂盒操作注意:样本处理时细胞/组织裂解液建议添加蛋白酶抑制剂防BCL2降解,避免反复冻融;试剂使用前需平衡至20-25℃,加样时更换枪头防交叉污染;洗板需彻底(推荐自动洗板机加30秒浸泡期),显色阶段避光以防TMB降解;终止液为腐蚀性稀硫酸,需佩戴防护手套,且加样顺序需与显色剂一致,确保反应充分[2]。

参考文献

[1] Rabinowitz R, Yu Y, Belov E, et al. Regulation of the expression of CD45 isoforms in the Farage human B cell lymphoma line and its 10.6.1 subline[J]. Immunol Investig, 2009, 38(6): 643-654. 

[2]Bai B ,Liu L ,Zhang N , et al.Heterodimerization of human apelin and bradykinin 1 receptors: Novel signal transduction characteristics[J].Cellular Signalling,2014,26(7):1549-1559.

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