二氯荧光黄，又称二氯荧光素，为橙黄色结晶粉末，微溶于氯仿和乙醇，不溶于水和稀酸，溶于醇和稀碱溶液，且溶液带黄绿色荧光，熔点为280℃(分解)。在生物学和医学研究中，二氯荧光黄可作为荧光染料用于细胞核示踪、蛋白质标记等；在分析化学中，可作为吸附指示剂，指示硝酸银滴定氯离子时的滴定终点，也可用于检测酸碱度变化；还可用于杀虫剂、防腐剂、荧光墨水等方面。
制备方法
将荧光素(100克，0.331摩尔)和PCl5(128.5克,0.62摩尔)在650毫升氯苯中的混合物在配有回流冷凝器的1升圆底烧瓶中搅拌和加热至140摄氏度。在6小时加热之后,将回流冷凝器替换为蒸馏装置，并蒸馏掉在反应过程中形成的POCl3以及氯苯。在去除所有的POCl3和氯苯之后,加入300克N-甲基吡咯烷酮并将所得混合物在搅拌下加热至100摄氏度，直至所有的粗二氯荧光黄溶解。溶液随后被倒入包含1升去离子水的4升烧杯中。褐色固体沉淀出并被收集在过滤器上和在真空炉中干燥。最终褐色固体符合市售二氯荧光黄的IR、NMR和TLC[1]。
应用
1、于文萃等人首次采用分光光度法研究了模拟生理条件(pH7.4 Tris-HCl缓冲溶液,离子强度I=0.1)下二氯荧光黄与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的情况。研究结果表明:两者相互作用形成稳定的复合物,最大吸收波长为509nm,与二氯荧光黄的最大吸收波长502nm比较,红移了7nm;两者之间主要通过静电引力结合,但并不排除疏水作用力和氢键;两者之间的结合数为32[2]。
2、曲枫等人为临床用人工肾透析液中氯化物总含量建立专属性测定方法。方法采用二氯荧光黄吸附指示剂法测定人工肾透析液中氯化物总含量，结果氯化物的平均加样回收率为98.1%,RSD为1.9%(n=6)。结论本法简便、快速、重复性好,为人工肾透析液的质量控制和评价提供了可靠的依据[3]。
参考文献
[1] 施乐公司. 着色剂化合物:CN200410062051.3[P]. 2005-02-09.
[2] 罗英,何冀川,万怀龙. 2,7-二氯荧光素与蛋白质相互作用的分光光度法研究[J]. 光谱实验室,2006,23(5):1099-1102. DOI:10.3969/j.issn.1004-8138.2006.05.055.
[3] 曲枫,王晓书,张红旭. 二氯荧光黄指示终点测定人工肾透析液中氯化物总含量[J]. 江苏药学与临床研究,2004,12(2):61-62. DOI:10.3969/j.issn.1673-7806.2004.02.028.