背景技术
2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，N‑亚硝基吗啉在2B类致癌物清单中。亚硝胺类在食品中的分布情况烟熏或盐腌的鱼及肉中含有较多的胺类，霉变的食品中有亚硝胺形成。亚硝胺能引起各种动物器官和组织肿瘤。是近几年FDA比较关注的一类基因毒性杂质。N-亚硝基吗啉的分子式为C4H8N2O2。
药物合成和制剂过程中需要对亚硝胺类杂质含量进行严格控制。对于制备利奈唑胺中间体Z1过程中产生的N‑亚硝基吗啉，不论是在原料药还是制剂中均需要进行严格控制。而亚硝胺类杂质的限度低，检测灵敏度低一直是亚硝胺类杂质在质量控制的难点和重点，实现利奈唑胺中间体Z1中N‑亚硝基吗啉的质量控制方面具有非常重要的社会意义和经济效益。目前公开报道的相关检测方法，检测灵敏度均无法满足利奈唑胺中间体Z1控制限度需求。
检测方法[1]
色谱条件为：高效液相色谱仪：岛津LC‑30AT；色谱柱：ACE UltroCore 2.5SuperPhenylHexyl(50×4.6mm，2.5μm)；流动相A：1mM甲酸铵，流动相B：甲醇，流动相A和流动相B的比例为10：90；流动相流速：0.5ml/min；色谱柱柱箱柱温：40℃；进样量：10μl。
质谱条件为：AB4500；ESI离子源，MRM正离子模式；雾化气(GS1)：50psi，加热辅助气(GS2)：50psi，门帘气：35psi，碰撞气：9psi，喷雾电压：5500V，离子源温度：550℃。驻留时间：200msce Q1:117.0→Q3:87.0。
检测步骤：(1)取N‑亚硝基吗啉的对照品，用稀释剂溶解制成待测样品，取待测样品进样，进行质谱分析，确定N‑亚硝基吗啉的精确分子量和最大响应碎片；(2)取利奈唑胺中间体Z1供试样品加稀释剂制成供试品溶液，再取稀释剂作为空白溶液，分别取供试品溶液及空白溶液进样，进行质谱分析，记录色谱图，完成基质和空白不干扰杂质检测的测定。(3)取N‑亚硝基吗啉的对照品，用稀释剂溶解并稀释制成待测样品，取待测样品进样，进行质谱分析，确定N‑亚硝基吗啉的灵敏度。
结果：基质不干扰杂质N‑亚硝基吗啉的检测，同时该方法可实现N‑亚硝基吗啉的高重现性和高灵敏度，LOD可做到0.1ng/ml，且可在10分钟内对N‑亚硝基吗啉进行分离、检测。
参考文献
[1] 重庆华邦胜凯制药有限公司. 一种LC-MS/MS法分离测定利奈唑胺中间体Z1中N-亚硝基吗啉的方法:CN202111591895.7[P]. 2023-05-30.