介绍
N-叔丁基甘氨酸 盐酸盐，又称2-叔丁氨基乙酸盐酸盐，可以和9‑氨基米诺环素进行缩合反应生产替加环素，是替加环素合成过程中的重要原料。
图一 N-叔丁基甘氨酸 盐酸盐
化学特性
N-叔丁基甘氨酸 盐酸盐的化学性质较为活泼，在储存过程中易吸潮并与水发生水解反应生成羧酸和氯化氢，导致其含量大幅降低，质量水平下降，检测时也不可以用含水溶剂进行溶解或稀释。易与醇发生醇解反应，生成对应的酯和氯化氢，因此检测时所用溶剂不可以为醇类。
检测
由于其与水或醇反应均或生成氯化氢，氯化氢会腐蚀仪器管路和零件并且损伤色谱柱，因此直接进行高效液相色谱法检测所用流动相也不可以为含醇或水的体系。作为替加环素合成过程中的重要原料，N‑叔丁基甘氨酸 盐酸盐的质量决定了替加环素合成过程中的投料比，直接影响替加环素的合成收率和最终产品的质量。
高效液相色谱法(HPLC)因具有分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高等特点被广泛应用于药物分析领域。用于检测N-叔丁基甘氨酸 盐酸盐的色谱条件：色谱柱：Waters Atlantis T3 250×4 .6mm×5μm；流动相：0 .5％三氟乙酸：乙腈＝95：5；流速：1 .0ml/min；柱温：30℃；样品池温度：10℃；波长：221nm；
对照品溶液制备：分别精密称定30、40、50、60、70mgN-叔丁基甘氨酸 盐酸盐自制对照品于容量瓶中，称取完成后立即分别加入15％三乙胺溶液10ml ，室温条件下震荡 10min；再加入2 .5％苯胺溶液5ml，在0～10℃下低温水浴震荡30min。完成上述衍生过程后， 用50％乙腈溶清上述溶液并定容至50ml，摇匀，制得线性系列溶液。
供试品溶液制备：按照上述N-叔丁基甘氨酸 盐酸盐对照品溶液制备过程，精密称定50mg待测样品于容量瓶中，称取完成后立即加入15％三乙胺溶液10ml，室温条件下震荡10min；再加入2 .5％苯胺溶液10ml，在0～10℃下低温水浴震荡30min。完成上述衍生过程后，用50％乙腈溶清上述溶液并定容至50ml，摇匀备用。
将N-叔丁基甘氨酸 盐酸盐对照品溶液进样检测，主峰与两侧杂峰均可实现良好分离。对照溶液连续进样6针，主峰面积的RSD为2.0％。在样品池温度设置为10℃的条件下，每隔2h进样一次，统计主峰面积变化；结论为第8h相对于0h ，对照品溶液主峰面积变化 RAD值为1 .2％，供试品溶液主峰面积变化RAD值为1 .6％。说明对照品溶液和供试品溶液在 8h内均稳定性良好。依次进样检测，以浓度(C)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标进行线性回归，回归方程为y＝5325 .3x+70536(R2＝0 .9993)，说明线性相关性良好[1]。
图二 N-叔丁基甘氨酸 盐酸盐的高效液相图谱
参考文献
[1]河北圣雪大成制药有限责任公司.一种检测N-叔丁基甘氨酸盐酸盐含量的方法:202210614373.2[P].2022-10-14.