改良HARRIS苏木素染色液是病理学和组织学最常用的细胞核染色剂之一,通过改进传统Harris配方,在安全性、稳定性和染色效果上均有显著提升。在病理制片技术中,苏木素-伊红(HE)染色是最经典、最常用的染色方法。苏木素本身并无染色能力,必须经氧化成为苏木红,并与媒染剂结合后才能对细胞核进行染色[1]。在众多苏木素配方中,改良HARRIS苏木素染色液凭借其优异的染色性能和操作便捷性,成为国内大多数病理科的首选。

经典配方
改良HARRIS苏木素染色液的典型配方为[1-2]:苏木素 2.5g,无水乙醇 25ml ,硫酸铝钾 50g ,蒸馏水 500ml ,氧化汞 1.25g ,冰醋酸 20ml 。
配制关键步骤
改良HARRIS苏木素染色液的配制过程直接影响其染色性能。具体步骤如下[1]:用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,用无水乙醇溶解苏木素,将苏木素乙醇溶液倒入已溶解的硫酸铝钾水溶液中,煮沸1分钟,稍冷却后缓慢加入红色氧化汞(注意安全,避免沸腾溢出),继续加热至染液变为紫红色,用纱布盖瓶口,使用前用滤纸过滤,每100ml染液中加入5ml冰醋酸。其中,氧化汞的加入时机和冰醋酸的添加量是影响改良HARRIS苏木素染色液染色效果的关键因素[1]。
染色原理
改良HARRIS苏木素染色液的染色作用基于以下原理[1]:苏木素经氧化脱氢后转变为苏木红,后者分子中含有醌苯环(发色团)和羟基(助色团),从而获得染色能力。苏木红对组织无直接亲和力,需要与媒染剂硫酸铝钾中的铝离子结合,形成带正电荷、呈碱性的蓝色色精。细胞核主要由脱氧核糖核酸(DNA)组成,带负电荷,呈酸性,因此极易与带正电荷的碱性染料结合,从而实现细胞核的特异性染色。
不同苏木素染液的差异
对三种常用苏木素染液的比较研究[1-2]:改良HARRIS苏木素染色液采用加热煮沸和氧化汞进行氧化,氧化程度高。Mayer苏木素染液的配方中含碘酸钠作为氧化剂,配制时需控制温度在70-80℃。Gill改良苏木素采用碘酸钠氧化,配方相对温和。进一步比较改良HARRIS苏木素染色液与Mayer、Lillis Mayer苏木素的效果发现,改良HARRIS苏木素染色液染色后细胞核颜色鲜艳、对比清晰,而Mayer苏木素背景更干净但核染色稍浅,Lillis Mayer改进型则背景干净且核染色鲜艳[2]。
参考文献
[1] 孙丽萍. 浅谈三种苏木素的配制及比较[J]. 实验与检验医学, 2010, 28(3): 318.
[2] 段淑云. 三种苏木素染色液临床应用分析与探讨[J]. 2015,22(7):771-772.