介绍
BCN-Osu是环丙烷环辛炔‑琥珀酰亚胺酯试剂，它可以由环丙烷环辛炔的高反应性和良好稳定性与NHS酯的高效活化能力相结合得到，解决了早期环辛炔试剂在稳定性、水溶性及与生物分子高效连接方面存在的部分问题，可用于实现生物分子的特异性、快速、温和且稳定的标记与功能化，极大地推动了化学生物学和生物医学研究的发展。
图一 BCN-Osu
合成
现有技术中BCN‑Osu合成存在收率和纯度低等问题，合成现有技术（Angew . Chem . Int . Ed . 2010 , 49 , 9422‑9425）需要采用价格高昂的催化剂Rh(OAc)2（购买厂商上海毕得医药科技股份有限公司，10g/¥14220），该中间体的合成收率极低，仅为24%，而且在该方法合成条件下，异构体3exo（exo‑双环[6.1.0]壬‑4‑烯‑9‑羧酸乙酯）和3endo（endo‑双环[6.1.0]壬‑4‑烯‑9‑羧酸乙酯）两个异构体的生成比例为2:1，且两个异构体极性相差不大，从而在分离纯化方面存在一定难度。继而导致BCN‑Osu的合成成本高、收率和纯度不高，在一定程度上限制了BCN‑Osu的工业应用。
S1、合成化合物3
1）在3L三口烧瓶中，加入300mLDCM、0.005molCu(MeCN)4BF4和8mol化合物1，N2保护，冰盐浴控温0‑10℃。
2）用200mL DCM将1mol化合物2溶解后缓慢滴加至反应瓶中，滴加完毕后撤去冰盐浴，25℃下反应。
3）TLC监测反应完全后浓缩反应液，硅胶拌样，柱层析分离（PE：EA=1：1），最后得 0 .4mol化合物3(相对化合物2摩尔产率为40 %，纯度95%)，为无色透明油状物。
S2、合成化合物4；
1）将0 .6mol LiAlH4的200 mL THF悬浊液加入至1000 mL三口烧瓶中，冰盐浴冷却至0℃。
2）将上一步得到的0 .4mol化合物3同样溶于干燥200 mL THF中并冷却至0℃，然后将其逐滴加至反应瓶中。
3）将所得灰色反应液在25℃下搅拌15min，随后再次冷却至0℃，并逐滴加入蒸馏水，直至观察到白色沉淀形成。混合物用元明粉干燥，过滤除去固体并用Et2O洗涤。浓缩后得到0 .38mol化合物4性状为黄色粉末状(产率为75%，纯度92%)。
S3、合成化合物5；
1）将0.38mol化合物4溶解于600ml DCM中，并冷却至0℃。
2）将0.57mol Br2的600ml DCM溶液在0℃下逐滴加入到反应体系中，直至溶液保持浅黄色不再褪去。
3）恢复室温（25℃）搅拌反应5 min后，溶液变为无色，TLC监测反应完全。反应混合物用Na2S2O3溶液淬灭。分液收集有机层用元明粉干燥，过滤，浓缩，得到0.34mol化合物5性状为粘稠黄色油状（产率为80%，纯度93%）。
S4、合成化合物6；
1）将0.34mol化合物5溶解于500 mL THF中，并冷却至0℃。
2）将2.04mol t‑BuOK缓慢加入反应瓶中，加完后溶液变为橙色。
3）将温度控制在30℃，回流2 h。冷却至室温后，反应液用饱和NH4Cl溶液淬灭，所得混合液用DCM洗涤5次，分液，将合并的有机相用元明粉干燥，过滤，浓缩。粗产物通过柱层析（EA:PE=1:30）纯化，得到0.21mol化合物6，性状为白色固体（产率62%，纯度98%）。
S5、合成化合物8；
1）在N2氛围下，将0.21mol化合物6和0 .84mol DIPEA溶解于超干300mL MeCN中，并将溶液冷却至0℃。
2）一次性加入0.42mol (SuO)2CO，撤去冷却，所得混合物在N2氛围下于25℃下搅拌6 h。
3）反应液经旋转蒸发浓缩后，使用PE:EA=3:2 (V/V)作为洗脱剂，通过柱层析分离得到0.19mol BCN‑Osu (化合物8) ，性状为白色固体(产率为90%，纯度98%)[1]。
图二 BCN-Osu的合成
参考文献
[1]四川普康药业有限公司.BCN-OSu及其中间体的合成方法:202511523057.4[P].2026-01-16.