嘌呤霉素(Puromycin,PM)是白黑链霉菌发酵产生的氨基糖苷类抗生素,为广谱蛋白质合成抑制剂,对原核与真核细胞均有作用。

应用研究
丁方睿等人探讨地黄叶总苷胶囊有效成分毛蕊花糖苷在治疗蛋白尿和保护足细胞中的作用机制。本研究通过建立嘌呤霉素大鼠肾病模型,检测尿蛋白、足细胞损伤标志物和电镜下观察足突融合状态探讨毛蕊花糖苷对蛋白尿治疗和对足细胞保护的作用;通过体外建立嘌呤霉素诱导足细胞损伤模型,进行足细胞活力实验、迁移实验、足细胞细胞骨架检测,以及足细胞损伤标志物nephrin检测,探讨毛蕊花糖苷对足细胞保护效应。结果,体内研究中,毛蕊花糖苷可以有效地降低嘌呤霉素大鼠蛋白尿水平(P<0.05),恢复足细胞损伤标志物nephrin、synaptopodin的蛋白表达(均P<0.05),缓解足细胞足突融合;体外研究中,毛蕊花糖苷可以有效恢复足细胞活力(P<0.05),降低足细胞受损后增强的迁移能力(P<0.05),保护足细胞细胞骨架,恢复nephrin蛋白表达(P<0.05)。因此,本研究证实毛蕊花糖苷可以通过保护足细胞降低嘌呤霉素诱导肾病大鼠蛋白尿及缓解嘌呤霉素诱导足细胞损伤,丰富了对地黄叶总苷胶囊降低蛋白尿作用的认识[1]。
为获取纯度较高的人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)。侯慧等人取手术切除的多余包皮剪碎,通过两次酶消化接种于35mm 6孔板中,加入含0.5μg/mL嘌呤霉素的内皮细胞培养基,3d后更换新鲜培养基;采用倒置单光子共聚焦显微镜观察内皮细胞形态;流式细胞术检测HDMEC细胞表面标志CD31的表达情况。结果,培养72h后可见内皮细胞长出,细胞呈圆形,生长至第5天左右,以梭形细胞为主,第6~10天迅速增殖,形成比较紧密的融合细胞,细胞集落中心为圆形细胞,周围为梭形,呈放射状,第10天可达80%融合,细胞呈典型铺路石样,可见“漩涡状”特征。流式细胞术检测显示HDMEC的CD31表达阳性,CD44表达阴性,内皮细胞纯度达98%以上。因此,该方法能够成功获得高纯度的人真皮微血管内皮细胞HDMEC,对皮肤疾病致病机制以及HDMEC的生物学特性和功能的深入研究具有重要意义[2]。
参考文献
[1]丁方睿,司南,边宝林,等. 毛蕊花糖苷对嘌呤霉素肾病及足细胞损伤模型的疗效研究[J]. 中华肾脏病杂志,2018,34(1):30-35. DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2018.01.006.
[2]侯慧,李娇,梁见楠,等. 嘌呤霉素介导的人真皮微血管内皮细胞的分离纯化培养与鉴定[J]. 中国皮肤性病学杂志,2019,33(11):1255-1259. DOI:10.13735/j.cjdv.1001-7089.201903088.