DF培养基是根际促生菌(PGPR)筛选专用基础培养基,以硫酸铵为唯一氮源;配套ADF培养基(将硫酸铵替换为ACC)配对使用,用于定性定量检测细菌ACC脱氨酶活性。

应用研究
许多的植物内生菌不仅可以促进宿主植物的生长,还能提高宿主的种子萌发率、根长及根的表面积。对其研究,可为利用植物内生促生菌提供重要理论支持。本研究采用多相分类方法对从采自内蒙古土默特右旗的细叶盐爪爪(Kalidiumcuspidatum)的茎中分离的一株命名为HU2P27T菌株进行分类鉴定,菌株HU2P27T可以产生吲哚乙酸(IAA),在DF培养基中培养72h时,可以产9.403±0.312mg/LIAA;菌株HU2P27T可以分泌铁载体[1]。
目前常用的动物肌腱研究模型(比如兔,罗曼鸡等)的培养方法存在周期长,细胞获取量少等不足,往往成为制约肌腱组织工程实验研究进程的瓶颈。王治等人希望建立SD大鼠鼠尾肌腱细胞培养流程,以期用较短时间获取大量种子细胞,为更高的工程化肌腱构造研究创造模型构建条件。设计、时间及地点:对比观察,于2006-02/11在四川大学生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室完成。材料:7~10dSD大鼠2只用于获取鼠尾腱细胞;第4代人包皮成纤维细胞由四川大学华西医院干细胞与组织工程研究室提供。方法:选用SD乳鼠,无菌条件下抽取尾腱,体积分数为10%的小牛血清+DF培养基悬浮组织块培养法获得鼠尾肌腱原代细胞,将第3代细胞与人包皮成纤维细胞为对照,行Ⅰ,Ⅲ型胶原免疫细胞化学染色,染色结果用image-pro plus 5.02行吸光度测量,并做统计分析。主要观察指标:SD大鼠尾腱细胞免疫细胞化学染色结果及染色吸光度测量[2]。
黄天姿等人为筛选能产生1-氨基环丙烷-1-羧基(ACC)脱氨酶的大豆植物根际细菌,从大豆根际土壤中分离得到10株大豆根际细菌,其中5株在DF培养基和ADF培养基中能以ACC作为唯一氮源生长。通过16S rDNA测序及生理生化实验证实,H1为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),H2为苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis),H8为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),H9为芽孢杆菌(Bacillus sp.),H10为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。ACC脱氨酶活力测定数据表明,芽孢杆菌(Bacillus sp.)的ACC脱氨酶活性最大,为0.0978U·mg-1[3]。
参考文献
[1] 王海涛. 一株植物内生水芽孢杆菌新种的分类鉴定和基因组分析[D]. 内蒙古:内蒙古大学,2022.
[2] 王治,陈曦,秦廷武,等. 组织工程肌腱细胞研究模型的构建:SD大鼠尾腱细胞可行吗?[J]. 中国组织工程研究与临床康复,2009,13(46):9011-9014. DOI:10.3969/j.issn.1673-8225.2009.46.001.
[3] 黄天姿,李同祥,汤薇,等. 大豆根际土壤产ACC脱氨酶细菌的分离与鉴定[J]. 南方农业,2022,16(6):1-3. DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2022.06.001.