2-溴-4'-硝基苯乙酮英文名称：2-Bromo-4'-nitroacetophenone，淡黄色至亮黄色结晶固体，熔点：94～96℃，易溶于二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮；溶于乙醇；难溶于水，属于α-溴代酮，烷基溴具有较强亲电性；避光保存，易发生水解。
合成方法[1]
将100g(0.61mol)对硝基苯乙酮加入到400mL二氯甲烷中,冰浴下向其中滴加107g(0.67mol)溴素的100mL二氯甲烷溶液,控制温度不高于5℃,滴毕,室温反应10h。反应结束后减压蒸除溶剂,向残余物中加入100mL异丙醚,搅拌1h。抽滤,滤饼用异丙醚洗涤,干燥，得浅黄色固体2-溴-4'-硝基苯乙酮115g,收率78.0%,纯度为95.1%(HPLC面积归一化法),mp95 ~97℃。ESI-MS m/z:242.0[M-H]-。
应用研究
2-(4-硝基苯基)咪唑并[2,1-b]苯井噻唑-7-醇(4)的合成：将58g(0.35mol)中间体2、110.5g(0.455mol)中间体2-溴-4'-硝基苯乙酮、35.3g(0.42mol)碳酸氢钠加入到1L异丙醇中,回流反应3h。反应结束后冷却至室温,析出黄色固体,抽滤,滤饼用水洗涤,干燥得粗品。将粗品用150mL丙酮重结晶,干燥,得黄色固体(4)99.4g,收率91.5%,mp182~184℃。ESI-MSm/z:310.0[M-H]-,621.0[2M-H]-[1]。
建立体外培育牛黄样品溶液柱前衍生化处理后使用HPLC-UV进行测定的方法。方法:2-溴-4'-硝基苯乙酮和18-冠醚-6作为衍生化反应试剂,采用Agilent Zorbax SB-C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以水为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,流速1mL·min-1,在263nm波长处进行测定,柱温为30℃。结果:胆酸和去氧胆酸进样量分别在0.25～4.00和0.20～3.21μg范围内线性关系良好;回收率分别为95.13％和94.87％,RSD(n=6)分别为2.09％和3.15％。3批样品的胆酸含量分别为7.3％、8.4％、8.1％,去氧胆酸含量分别为4.9％、5.6％、5.4％。结论:该法经方法学验证,适用于体外培育牛黄中主要胆汁酸类成分的含量测定[2]。
本研究从经苯巴比妥诱导处理的犬肝脏微粒体中，分离纯化得到表观均一的微粒体环氧化物水解酶（mEH）。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定，该纯化酶最小分子量为47000。以7-环氧丙氧基香豆素（GOC）为底物，并结合多种效应物，对犬微粒体环氧化物水解酶的酶学性质开展表征。体外激活剂甲吡酮与异喹啉能够提升微粒体粗酶活性；但针对该底物体系，甲吡酮对纯化后的酶无激活作用。所有环氧化物水解酶抑制剂——1,1,1-三氯丙烯-2,3-环氧化物（TCPO）、环己烯环氧化物以及2-溴-4'-硝基苯乙酮（BrNAP）均可抑制水解酶活性。该纯化酶的氨基端氨基酸序列与大鼠环氧化物水解酶cDNA推导序列具有高度同源性（90%）。利用纯化酶免疫家兔制备得到的抗血清，可与大鼠、豚鼠环氧化物水解酶发生交叉反应。犬肝脏微粒体中的该酶不存在性别表达差异[3]。
参考文献
[1] 吴亚闯,郭壮,付宝林,等. FLT3激酶抑制剂奎扎替尼的合成工艺改进[J]. 中国药物化学杂志,2016,26(5):397-401. DOI:10.14142/j.cnki.cn21-1313/r.2016.05.009.
[2] 石岩,孙冬梅,魏锋,等. 柱前衍生HPLC法测定体外培育牛黄中主要胆汁酸类成分[J]. 药物分析杂志,2016,36(11):2046-2050. DOI:10.16155/j.0254-1793.2016.10.24.
[3] NoritakaAriyoshi, MitsukoTanaka, YujiIshii, et al. Purification and Characterization of Dog Liver Microsomal Epoxide Hydrolase[J]. Journal of Biochemistry,1994,115(5):985-990.