S100家族蛋白是一类低分子量(约10~12 kDa)的EF-手型钙结合蛋白,广泛参与细胞增殖、分化、迁移、凋亡以及钙信号转导等基本生命过程。S100A11是S100家族的重要成员,S100A11抗体能够帮助研究者准确追踪该蛋白在组织、细胞乃至体液中的表达水平与分布位置,为阐明其在疾病发生发展中的角色提供最直接的实验证据。
蛋白质组学是发现候选标志物的有效途径,S100A11正是经由这一途径走进研究者视野的。实验中应用双向凝胶电泳结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),对人肺癌组织与配对癌旁组织的可溶性总蛋白进行了分离与鉴定,发现包括S100A11(Calgizzarin)在内的多个蛋白仅在肺癌组织中异常表达,提示S100A11参与了肺癌的发生与发展过程,可能成为肺癌诊断与预后评估的候选分子[1]。在这类研究中,研究者借助免疫印迹与免疫组织化学等技术,对质谱鉴定出的差异蛋白进行独立交叉验证,从而显著提高发现的可靠性。因此,S100A11抗体是连接蛋白质组筛选与功能验证两个环节之间的桥梁。

在病毒感染与肿瘤发生关系的研究中,研究人员以抑制性消减杂交及基因表达谱芯片的筛选结果为基础,克隆了S100A11基因启动子并构建报告基因载体,在肝癌细胞系中证实乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)能够反式激活S100A11启动子,共转染后报告基因(CAT)的表达活性明显升高,提示HBV感染可能通过上调S100A11参与肝细胞的病变乃至肝癌的发生[2]。该研究同时指出,S100A11可与肌动蛋白结合并抑制肌球蛋白ATP酶活性,细胞发生恶性转化后其表达水平显著降低,而强制性表达S100A11则可抑制恶性细胞的生长,提示其可能是一种新型的肿瘤抑制相关分子[2]。这一系列功能学探讨中,无论是检测HBx作用前后S100A11蛋白水平的变化,还是观察其在细胞内的定位与迁移,S100A11抗体都是核心试剂。
金红在其博士学位论文中,对妊娠高血压综合征与胰腺癌进行了系统的蛋白质组学研究,建立了优化的胰腺组织双向凝胶电泳技术,并在胰腺癌组织与癌旁组织的差异蛋白鉴定中发现包括钙结合蛋白家族成员(如S100A11)在内的多种差异表达蛋白质,其中部分蛋白在癌组织中表达上调、部分表达下调,作者指出这些蛋白可作为胰腺癌的候选蛋白标志物和药物治疗的靶蛋白[3]。在该类大规模筛查工作中,S100A11抗体可用于对候选差异蛋白进行组织学定位与定量验证,帮助研究者判断S100A11在胰腺癌发生中的实际角色。这也说明,以S100A11抗体为代表的特异性抗体,是推动蛋白质组学发现走向临床应用的重要转化工具。
从技术层面看,S100A11抗体已在多种实验体系中得到广泛验证。在免疫印迹实验中,S100A11单体分子量约为11 kDa,特异性良好的S100A11抗体能够在复杂的蛋白混合物中清晰识别目标条带,在免疫组织化学与免疫荧光实验中,S100A11抗体可揭示该蛋白在肿瘤组织、胎盘组织等不同病理标本中的分布特征与亚细胞定位,在免疫沉淀及染色质免疫沉淀等蛋白-蛋白、蛋白-DNA相互作用研究中,S100A11抗体更是捕获靶蛋白复合物的关键试剂。选择一款经多种应用场景验证、批间稳定性良好的S100A11抗体,有助于减少实验中的非特异性信号,提高结果的可重复性,从而帮助研究者节省大量重复优化实验条件的时间与精力。
参考文献
[1] 张慧珍,巴月,杨继要,等. 肺癌相关蛋白的筛选与鉴定[J]. 第四军医大学学报,2007,28(1):6-8.
[2] 洪源,成军,杨倩,等. 乙型肝炎病毒X蛋白上调S100钙结合蛋白A11基因启动子表达活性研究[J]. 解放军医学杂志,2004,29(5):377-379.
[3] 金红. 妊娠高血压和胰腺癌发病机制的蛋白质组学研究[D]. 上海:复旦大学,2007.