氯倍他索（Clobetasol Propionate，Clo）是强效的局部皮质激素，临床上常用于治疗湿疹、唇疱疹、牛皮癣和硬化性苔癣。研究表明，氯倍他索可通过激活SHH信号通路促进神经祖细胞增殖，并且氯倍他索可促进少突胶质细胞前体细胞向成熟少突胶质细胞分化。值得注意的是，体内实验同样证实氯倍他索具有拮抗脱髓鞘病变的功能。
活性研究
研究氯倍他索(Clo)对鼻粘膜外胚层间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法:贴壁筛选法分离培养EMSCs,免疫荧光法鉴定体外扩增的EMSCs;MTT法检测氯倍他索对EMSCs增殖能力的影响;成神经样细胞诱导实验分为Clo组、音猬因子(SHH)组和空白对照组,采用全反式维甲酸(ATRA)诱导各组细胞向神经样细胞分化;倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫荧光和免疫印迹方法检测神经元细胞相关蛋白。结果:体外分离培养的EMSCs高表达间充质干细胞和神经嵴源干细胞标志物Vimentin和Nestin，各组EMSCs成神经样细胞诱导7d后,Clo组和SHH组EMSCs呈现双极和多极的典型神经样细胞形态并且高表达神经元细胞相关蛋白，Clo组EMSCs表达SHH和SMO的水平明显高于空白对照组,与SHH组比较差异无统计学意义(P>0.05);氯倍他索可促进EMSCs分泌内源性脑神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)。结论:氯倍他索可通过激活SHH信号通路和上调内源性神经营养因子水平促进EMSCs向神经样细胞分化[2]。
合成方法
将PhSiH3(1.0g,9.26mmol)溶于乙醇(3mL)中,并于10°C下,氧气条件下,将所得的溶液滴加至化合物孕甾-16-甲基-4,9(11),16-三烯-3,20-二酮(1.5g,4.63mmol)与三乙酰丙酮铁(49.2mg,0.14mmol)的乙醇(20mL)溶液中。滴加完毕后,于O2条件下室温搅拌10小时。反应结束后,加入亚磷酸三乙酯(0.77g,4.63mmol),并继续室温搅拌20分钟。然后加入30mL水,有机相用乙酸乙酯(3X50mL)萃取,合并有机相经50mL饱和氯化钠的水溶液洗涤,无水硫酸钠干燥。减压除去溶剂,柱层析(梯度:0-50% EA in PE)分离得到白色固体产物孕甾-16-甲基-17a-羟基-4,9(11)-二烯-3,20-二酮即氯倍他索。(1.27g,3.70mmol,80%yield),dr值为98:2 m.p:167.2-168.3℃。1HNMR(400MHz,CDCl3) δ5.74(1H,d,J=1.2),5.50(1H,dd,J=16.3,4.9),2.97(1H,s),2.68-2.42(4H,m),2.39-2.31(1H,m),2.26(3H,s),2.25-1.99(6H,m),1.83-1.70(1H,m),1.65(1H,ddd,J=17.0,5.8,1.5),1.34(3H,s),1.19(3H,d,J=7.2),1.17-1.08(2H,m),0.87(3H,s)[1]。
参考文献
[1] 复旦大学. 一种16β-甲基-17α-羟基糖皮质激素及类似物的制备方法:CN202311809796.0[P]. 2024-07-12.
[2] 史文涛,戴瑶,毕士奇,等. 氯倍他索促进鼻粘膜间充质干细胞成神经样细胞分化[J]. 神经损伤与功能重建,2019,14(1):1-5. DOI:10.16780/j.cnki.sjssgncj.2019.01.001.