研究背景
多粘菌素E又称为粘菌素，是一个由多种组分组成的多肽类抗生素，主要由Polymyxin E1和Polymyxin E2组成。20世纪50年代多粘菌素E开始应用于临床，主要用于对抗铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等革兰氏阴性菌引起的感染，特别是由多重耐药绿脓杆菌引起的感染的治疗。临床使用的多粘菌素E主要有两种，一种是口服或局部使用的硫酸多粘菌素E，另一种则是供注射用的多粘菌素E甲磺酸钠，主要毒性为肾毒性和神经毒性，后者比前者要小得多，LD50降低了50倍以上[1]。
物质概述
多粘菌素E甲磺酸钠是一种多肽类抗生素制剂，化学式为C58H105N16Na5O28S5。研究表明，该药物可以改变细菌细胞膜通透性，因而能够实现杀菌目的。作用范围方面，其主要用于治疗革兰氏阴性杆菌引起的感染，特别是多重耐药铜绿假单胞菌感染。
制备方法
文献报道了一种将多粘菌素E甲磺酸钠从含有小分子量杂质的混合物中分离纯化的方法，特征在于使用截流分子量在1000～10000之间的超滤膜利用超滤膜分离技术制备高纯度多粘菌素E甲磺酸钠，步骤如下：(a)将硫酸多粘菌素E加水溶解，向其中加入甲醛溶液，将二者进行反应；(b)向步骤(a)的反应产物中加入亚硫酸氢钠溶液，继续反应；(c)取步骤(b)中的反应溶液，采用超滤膜进行分离纯化。该发明提供的多粘菌素E甲磺酸钠的分离纯化方法具有低污染，低能耗，工艺简单，重现性好，且所得产品的纯度和活性很高的优点[2]。
应用
生物医药技术领域公开了一种多粘菌素E甲磺酸钠在制备治疗三阴性乳腺癌药物中的应用。以多粘菌素E甲磺酸钠为唯一活性成分，验证了多粘菌素E甲磺酸钠抑制三阴性乳腺癌细胞活力和增殖，阻滞细胞周期在G2/M期，促进细胞凋亡，并且能够抑制三阴性乳腺癌细胞迁移和侵袭，可以成为治疗三阴性乳腺癌的有效药物[3]。
分析研究
实验建立液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中多粘菌素E甲磺酸钠(CMS)及其活性成分多黏菌素E的方法并进行应用。具体地，通过多黏菌素E主成分E1及E2浓度之和间接得到多黏菌素E的浓度。在大鼠血浆样品中加入硫酸对CMS进行水解，通过测定水解后与水解前血浆样品中多黏菌素E的浓度差间接测定CMS浓度。采用固相萃取法对样品进行预处理。色谱柱选择Phonomenex Kinetex XB-C18柱，质谱采用电喷雾电离源(ESI源)及多反应监测(multi-reaction monitoring，MRM)模式。其中待测物质多黏菌素E1，多黏菌素E2，内标多黏菌素B1的离子通道分别为m/z390.7→101.3，m/z 386.0→101.2，m/z 402.3→101.2。
结果，多黏菌素E1及E2的测定不受大鼠血浆中内源物质的影响，且分别在0.187~6.24 mg/L，0.0370~1.23 mg/L内线性良好，批内与批间精密度良好，变异系数均<15%。多黏菌素E1，E2准确度范围分别为100.1%~113.3%和94.9%~107.3%。多黏菌素E1，E2的提取回收率分别为21.8%，22.0%。多粘菌素E甲磺酸钠(CMS)血浆样品室温下放置100 min稳定，多黏菌素E血浆样品室温下放置120 min稳定，以上样品均可在-20℃放置7 d，-70℃放置28 d，预处理后样品在自动进样器中放置24 h，在-20℃及-70℃下反复冻融3次后均稳定。对CMS样品进行1:10(v/v)的稀释不影响该方法的检测。该方法对于CMS的水解稳定性良好，批内及批间平均水解率分别为73.9%，71.9%。该研究建立了一种灵敏，准确，采样量小的LC-MS/MS方法，通过测定水解后的多黏菌素E1及E2，间接测定大鼠血浆中CMS及其多黏菌素E的浓度。在降低采样量的同时也提高了检测灵敏度，该方法适用于大鼠CMS的PK研究[4]。
参考文献
[1]魏健,贺玉林,李亚楠,等.多粘菌素E甲磺酸钠合成工艺改进[J].生物技术世界,2014,(5):51.
[2]冯军,张喜全,朱裕辉,等.一种多黏菌素E甲磺酸钠的分离纯化方法.2013.
[3]吕林林,伍会健,董得时,等.多粘菌素E甲磺酸钠在制备治疗三阴性乳腺癌药物中的应用:202310650170[P].
[4]郭晨雪,刘笑芬,曲星伊,等.液相色谱串联质谱测定大鼠血浆中多黏菌素E甲磺酸钠及多黏菌素E方法的建立及应用[J].中国感染与化疗杂志, 2023, 23(3):347-355.DOI:10.16718/j.1009-7708.2023.03.012.