概述
RAB3C 抗体是科研中用于检测和解析 RAB3C 蛋白的重要工具。RAB3C 是一种小分子 GTP 酶,在囊泡运输,特别是神经递质释放和受调控的胞吐过程中扮演关键角色。RAB3C 是人类 RAB3C 基因编码的 Ras 相关蛋白 RAB3C,属于 RAS 超家族中的小 GTP 酶。主要表达于脑、肾上腺、垂体等组织,在胎盘和肺中也有表达。计算分子量约为 26 kDa,在 Western Blot 中观察到的条带通常在 22-28 kDa 之间。可与 RIMS2、RPH3A、RPH3AL 等蛋白相互作用,共同参与囊泡运输的调控网络。

Rab3b/3c阳性溶酶体相关细胞器参与抗原交叉递呈
通过针对57个RAB GTPase的siRNA文库筛选,在树突状细胞中鉴定出RAB3B、RAB3C与RAB32参与外源抗原的交叉递呈。该研究采用EYFP-RAB3B、EYFP-RAB3C融合蛋白示踪,并以大鼠抗小鼠LAMP-1抗体标记溶酶体、以抗MHC-I类抗体染色,激光共聚焦证实MHC-I类分子储存在RAB3B,3C阳性囊泡中。结果提示:RAB3B,3C阳性溶酶体相关细胞器可能参与了MHC-I类分子在细胞膜和吞噬体之间的转运,RAB3B,3C阳性囊泡溶酶体性质的非酸性囊泡,通过调节DC胞内回运参与调节DC细胞抗原递呈[1]。该研究中,对RAB3C的定位是通过荧光标签蛋白与商品化LAMP-1抗体,若要在原代树突状细胞中直接读出内源RAB3C蛋白的亚细胞定位与丰度,则需要用到内源RAB3C抗体进行识别。
RAB3C抗体验证非小细胞肺癌中RAB3C表达并揭示其促侵袭作用
在验证非小细胞肺癌中RAB3C表达关系的研究中,下调RAB3C可抑制非小细胞肺癌细胞的上皮间质转化与侵袭转移。RAB GTPase 3C(RAB3C)属于RAB家族,在人体正常生理状态下,RAB家族蛋白主要负责调控细胞膜特性、囊泡运输等[2],有研究表明,RAB3C在结直肠癌组织中高表达,并且其表达水平与肿瘤的远处转移及预后不良成正相关[2]。使用RAB3C抗体,并以外购抗体在A549与NCI-H1299细胞中验证RAB3C的mRNA及蛋白表达。Western blot步骤为用蛋白封闭液室温封闭3 h后,加入稀释后的抗体,4 ℃孵育12 h以上。充分冲洗后加入与一抗对应的鼠源或兔源辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗,继续室温孵育1 h。结果显示siR-RAB3C转染组细胞RAB3C的mRNA及蛋白表达量均下调,且划痕试验结果显示,与对照组细胞相比,siR-RAB3C组细胞迁移率显著减少。机制上通过Western blotting方法检测这三种蛋白表达发现,下调RAB3C上调E-cadherin表达,同时抑制N-cadherin和Vimentin的表达[2]。文中直接以RAB3C抗体作为蛋白水平读数的核心工具,是RAB3C抗体在肺癌侵袭研究中的完美典范。
RAB3C抗体在肺腺癌组织中高表达并关联不良病理特征
孟庆军的论文证明瓜氨酸通过调控RAB3C促进肺腺癌细胞的生长、转移与糖酵解。生信与细胞实验显示RAB3C在经瓜氨酸处理的LUAD细胞中表达显著上调。瓜氨酸可与RAB3C结合,并促进其在LUAD细胞中的表达[3]。免疫组化部分采用RAB3C抗体检测肿瘤组织中RAB3C表达,结果显示瓜氨酸处理组肿瘤组织中Ki-67和RAB3C的表达量均高于对照组肿瘤组织,并RAB3C在LUAD肿瘤组织中显著高表达,并与LUAD患者的较高的原发肿瘤分期、TNM分期,较大的肿瘤体积和更多的淋巴结转移呈正相关[3]。功能上RAB3C敲低部分逆转了瓜氨酸处理对LUAD细胞增殖、迁移、侵袭、糖酵解和EMT进程的促进作用,且在LUAD细胞中,RAB3C通过形成RAB3C/SYT7/STXBP1蛋白三元复合物来增强STXBP1的稳定性,并抑制STXBP1的泛素化和降解[3]。体内研究进一步以瓜氨酸在裸鼠体内通过调节RAB3C促进LUAD进展概括,即瓜氨酸在体内对LUAD细胞的促进作用依赖于对RAB3C的调控[3]。在细胞与分子层面,以RAB3C抗体进行Western blot与免疫共沉淀。该论文中,RAB3C抗体在肺腺癌的体内外模型中均承担了目标蛋白的读取功能。
参考文献
邹丽云. 树突状细胞抗原交叉递呈相关Rab分子的筛选及Rab3b,3c,32参与抗原交叉递呈的机制研究[D]. 重庆: 第三军医大学, 2009.
张声林, 蔡浩, 戚利坤, 张波. 下调RAB3C减低上皮间质转化抑制非小细胞肺癌细胞的侵袭和转移[J]. 现代肿瘤医学, 2020, 28(11): 1825-1828.
孟庆军. 瓜氨酸通过调控RAB3C促进肺腺癌细胞生长、转移以及糖酵解的分子机制研究[D]. 石家庄: 河北医科大学, 2025.