核蛋白提取试剂盒

核蛋白提取试剂盒是一种用于从组织或细胞中提取核蛋白的实验工具。通过温和裂解细胞或组织释放靶蛋白，并利用特异性结合、离心分离及缓冲液洗脱等技术去除杂质（如核酸、脂类等），最终获得高纯度、高活性的目标蛋白。  

细胞核蛋白提取步骤：
1.将细胞自瓶壁上消化下来，收集于Eppendorf管，在4℃下，300g离心5min , 并用PBS 洗涤1-2次；
2.4℃下，300g离心10min 后，弃上清，加入5倍体积的浆蛋白提取试剂（每20μL细胞沉淀加入100μL），轻轻上下颠倒混匀细胞，注意勿涡旋；
3.将细胞悬液置于冰上20min；
4.4℃下，250g离心20min，弃上清，细胞沉淀加入2倍体积的预冷的浆蛋白提取试剂；
5.用针头直径为0.14mm的注射器吹打5次；于4℃下，10000g离心30min；
6.离心后的上清液包含胞浆蛋白，沉淀包含核蛋白。取沉淀继续以下操作；
7.加入50-100uL的核蛋白抽提试剂后，用针头直径为0.14mm的注射器吹打5次，冰上低速揺床45min；
8.4℃下，16000g离心5min，收集的上清液为细胞核蛋白。
组织核蛋白提取步骤：
1.称重后，尽可能切成非常细小的碎片；
2.每50mg组织加入300-500μL PBS，冰浴条件下，用匀浆器充分匀浆，构造悬液；
3.4℃下，将细胞悬液500g离心3min，吸弃上清，收集沉淀；
4.在收集的沉淀中，加入200μL浆蛋白提取液，参照上述步骤3及后续步骤，即可完成核蛋白的提取。