黄体生成素

黄体生成素是由垂体分泌的、由α、β两个不同亚基非共价结合成的异二聚体糖蛋白，分子量为29Kda，含有三个糖链。糖链的存在是维持黄体生成素生物效价必需的，其末端唾液酸含量的变化形成了不同的电荷异构体。黄体生成素的α亚基与尿促卵泡素、促甲状腺素、绒促性素具有相同的氨基酸顺序，各自β亚基的不同导致了不同的生物活性。黄体生成素具有治疗价值，可以用于治疗黄体生成素缺乏引起的一系列疾病。而目前黄体生成素是在绝经后尿促性腺素制剂中与尿促卵泡素按固定比例发挥作用，对临床应用造成了很大的限制。 黄体生成素由腺垂体嗜碱粒细胞分泌，存在于人的血液和尿液中，其作用是刺激卵巢内成熟卵子的释放。一、采集绝经后5～20年的55岁～70岁健康妇女尿液后经过高岭土吸附、乙醇抽提、硅酸滤吸附后制备黄体生成素粗品(LH活性208IU/mg) 二、进行阴离子交换层析方法对粗品进行初步纯化，先经过Q-Sepharose FF层析，层析条件选为0.01M Tris缓冲液，pH9.5，0～1M NaCl线性梯度洗脱，收集含黄体生成素组分，超滤脱盐； 三、进行阳离子交换层析方法对粗品进一步纯化，然后使用SP-Sepharose FF层析，层析条件选为0.01M NaAc，pH5.2，0～1M NaCl线性梯度洗脱，收集含黄体生成素组分，超滤脱盐； 四、进行疏水层析方法进一步纯化，再使用phenyl-SepharoseFF(Amersham-Pharmacia公司产品)进行纯化，层析条件选为0.01M Tris缓冲液，1M NaCl，pH7.2，用1M～0M NaCl线性梯度洗脱，收集含黄体生成素组分，超滤浓缩； 五、进行分子筛凝胶层析方法将黄体生成素与残存的杂蛋白分开，最后使用Sephadex G-100凝胶过滤，流动相为0.02M NH4Ac，pH7.0。收集含黄体生成素的活性组分，冷冻干燥得到高纯度黄体生成素。Luteinizing hormone (human) 是垂体 (LH) 产生的一种异二聚体糖蛋白激素，在人类生殖中起关键作用。