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大鼠精原干细胞如何培养

发布日期:2025/10/27 10:00:14发布人:上海雅吉生物科技有限公司

大鼠精原干细胞如何培养https://www.yajimall.com/

1. 产品名称:大鼠精原干细胞

2. 组织来源:睾丸组织

3. 产品规格:5×105 cells/T25细胞培养瓶

4. 细胞简介:

大鼠精原干细胞分离自睾丸组织;精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞,是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些独特优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染,异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。在哺乳动睾丸内,精子发生时一个受高度调控和持续的过程,精原干细胞(SSCs)一方面进行自我更新维持干细胞数量,另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至最后生成精子。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处,是哺乳动物精子发生的最原始细胞,也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立,在生物学、医学、畜牧业生产及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能,是哺乳动物体内唯一能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。

本公司生产的大鼠精原干细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化,结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×105 cells/瓶;细胞经Oct-4、c-Kit免疫荧光鉴定,纯度可达85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5. 培养基信息:

DMEM-F12、FBS、bFGF、GDNF、Penicillin、Streptomycin等

我们推荐使用大鼠精原干细胞专用完全培养基作为体外培养大鼠精原干细胞的培养基。

二、细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

三、使用方法

在技术部标准操作流程下,大鼠精原干细胞可传1-2代左右,随着传代次数的增加,细胞会呈现老化状态,生长速度减缓,1代以内细胞状态最佳;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

四、注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

5. 该细胞只可用于科研。

备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考



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