1. 产品概述
由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗MLL1亲和纯化抗体(货号:A300-086A),经抗原亲和纯化,特异性靶向人源MLL1蛋白(混合谱系白血病蛋白1,亦称KMT2A)。该抗体适用于免疫沉淀及蛋白免疫印迹应用,是研究组蛋白甲基化修饰、HOX基因表达调控及血液系统恶性肿瘤分子机制的重要工具。
2. 关键规格参数
项目 | 规格
目标抗原| MLL1(混合谱系白血病蛋白1 / KMT2A)
验证反应性| 人
宿主/克隆性| 兔 / 多克隆
抗体形式| 完整IgG分子
免疫原| 人MLL1蛋白内部区域(第725–775位氨基酸附近)
特异性表位| 人MLL1蛋白第720–780位残基之间(参照Swiss-Prot Q03164)
表位定位说明| 该表位位于MLL1经蛋白水解剪切后产生的N端300 kDa片段内,且存在于异构体14P-18B中
纯度| 抗原亲和纯化
浓度| 1000 µg/mL
保存缓冲液| Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液,pH 7–8,含0.09%叠氮化钠
保存条件| 2–8°C(请勿冷冻)
有效期| 自收货之日起1年
3. 推荐工作浓度与实验条件
应用 | 推荐稀释比例/用量 | 备注
Western Blot(WB)| 1:2,000 – 1:10,000 | 使用含5%脱脂牛奶的TBST进行封闭及抗体稀释;一抗建议4°C孵育过夜;细胞裂解物WB推荐使用山羊抗兔IgG(H+L)二抗(如A120-101P)
Immunoprecipitation(IP)| 6 µg/mg 裂解物 | 沉淀完成后进行WB检测时,推荐使用HRP标记的抗兔IgG轻链特异性二抗,并在封闭液中加入5%正常猪血清(如S100-020)以消除重链干扰
4. 产品特性与背景信息
靶标蛋白功能:MLL1(基因符号KMT2A)是一种组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶,催化组蛋白H3赖氨酸4(H3K4)的甲基化修饰,作为重要的表观遗传调控因子,在胚胎发育过程中维持HOX基因簇的精确表达。MLL1基因频繁参与染色体易位,形成MLL融合蛋白,与急性白血病(尤其是婴儿白血病和治疗相关继发性白血病)的发生密切相关。
表位与异构体特异性:本抗体靶向的表位位于MLL1蛋白第720–780位氨基酸,该区域位于MLL1经taspase1蛋白酶剪切后产生的N端300 kDa片段(N320)上。抗体可识别异构体14P-18B,但可能不识别N端截短的MLL1变体,建议根据目标异构体选择适用性。
主要别名:ALL-1、HRX、TRX1、CXXC7、混合谱系白血病蛋白1、组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶2A。
基因信息:GeneID 4297,Uniprot ID Q03164。
5. 储存与稳定性
储存:收到后请于2–8°C环境下垂直保存,避免反复开盖。切勿冷冻,冷冻可能导致抗体聚集变性及效价下降。
稳定性:在推荐储存条件下,自收货之日起1年内保持性能稳定。
6. 操作注意事项
IP-WB关键要点:进行免疫沉淀后的Western blot检测时,务必使用抗兔IgG轻链特异性二抗,以避免IP体系中兔IgG重链(约55 kDa)的干扰信号。若使用常规抗兔IgG(H+L)二抗,重链信号可能掩盖目标蛋白在相应分子量区域的条带。
靶蛋白分子量:MLL1全长约430 kDa,但细胞中主要以N端300 kDa剪切片段(N320)和C端180 kDa片段(C180)的形式存在。本抗体识别N端片段,WB检测预计在~300 kDa处出现条带。
本抗体含0.09%叠氮化钠作为防腐剂,若后续实验涉及抗体标记偶联,建议使用前通过透析或脱盐柱去除。
建议设置已知表达MLL1的阳性对照细胞系(如HeLa、K562)裂解物,以验证实验体系有效性。