1. 产品概述
由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗HdmX/MDM4亲和纯化抗体(货号:A300-287A),经抗原亲和纯化,特异性靶向人源HdmX/MDM4蛋白(小鼠双微体4的人同源物,亦称MDMX)。该抗体适用于免疫沉淀及蛋白免疫印迹应用,是研究p53信号通路调控、MDM2-MDM4协同机制及肿瘤发生发展的重要工具。
2. 关键规格参数
项目 | 规格
目标抗原| HdmX/MDM4(p53调控蛋白MDM4)
验证反应性| 人
宿主/克隆性| 兔 / 多克隆
抗体形式| 完整IgG分子
免疫原| 人MDM4蛋白内部区域(第125–175位氨基酸)
特异性表位| 人MDM4蛋白第125–175位残基之间(参照NP_002384.2)
纯度| 抗原亲和纯化
浓度| 1000 µg/mL
保存缓冲液| Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液,pH 7–8,含0.09%叠氮化钠
保存条件| 2–8°C(请勿冷冻)
有效期| 自收货之日起1年
3. 推荐工作浓度与实验条件
应用 | 推荐稀释比例/用量 | 备注
Western Blot(WB)| 1:1,000 – 1:5,000 | 使用含5%脱脂牛奶的TBST进行封闭及抗体稀释;一抗建议4°C孵育过夜;细胞裂解物WB推荐使用山羊抗兔IgG(H+L)二抗(如A120-101P)
Immunoprecipitation(IP)| 6 µg/mg 裂解物 | 沉淀完成后进行WB检测时,推荐使用HRP标记的抗兔IgG轻链特异性二抗,并在封闭液中加入5%正常猪血清(如S100-020)以消除重链干扰
4. 产品特性与背景信息
靶标蛋白功能:MDM4(亦称HdmX、MDMX)是p53通路的关键负调控因子。其蛋白结构包含RING指结构域,可与MDM2形成异源二聚体,增强MDM2对p53的泛素化降解效率。此外,MDM4还可通过直接结合p53的转录激活域,抑制p53介导的靶基因转录。MDM4的过表达在多种人类肿瘤(如乳腺癌、黑色素瘤、视网膜母细胞瘤)中被发现,是肿瘤免疫逃逸和耐药的重要机制之一。
MDM2与MDM4的区别:MDM4与MDM2在结构和功能上高度相似,但两者均受p53转录调控,且MDM4不被MDM2泛素化降解,具有独立的调控机制。本抗体特异识别MDM4(人MDM4蛋白第125–175位),不识别MDM2,使用时无需担心交叉反应。
主要别名:HdmX、MDMX、MRP1、双微体4蛋白、mdm2样p53结合蛋白。
基因信息:GeneID 4194,Uniprot ID O15151。
5. 储存与稳定性
储存:收到后请于2–8°C环境下垂直保存,避免反复开盖。切勿冷冻,冷冻可能导致抗体聚集变性及效价下降。
稳定性:在推荐储存条件下,自收货之日起1年内保持性能稳定。
6. 操作注意事项
IP-WB关键要点:进行免疫沉淀后的Western blot检测时,务必使用抗兔IgG轻链特异性二抗,以避免IP体系中兔IgG重链(约55 kDa)的干扰信号。若使用常规抗兔IgG(H+L)二抗,重链信号可能掩盖目标蛋白在相应分子量区域的条带。
靶蛋白分子量:MDM4理论分子量约55 kDa,但WB检测中常出现多条带,可能反映不同磷酸化修饰状态或剪切异构体,属正常现象。
本抗体含0.09%叠氮化钠作为防腐剂,若后续实验涉及抗体标记偶联,建议使用前通过透析或脱盐柱去除。
建议设置已知表达MDM4的阳性对照细胞系(如HeLa、MCF-7)裂解物,以验证实验体系有效性。