1. 产品概述
由艾美捷代理Bethyl推出的亲和纯化兔抗BRD2多克隆抗体(货号:A302-583A),经抗原亲和纯化获得,特异性识别人源BRD2蛋白(含溴结构域蛋白2)。抗体靶向BRD2蛋白第675至725位氨基酸区域,适用于免疫组化(IHC)、免疫沉淀(IP)及蛋白质印迹(WB)等应用,是研究表观遗传调控、细胞周期转录及染色质重塑的重要工具。
2. 核心规格参数
项目 | 规格详情
靶标| BRD2(含溴结构域蛋白2)
验证反应种属| 人,小鼠
宿主| 兔
克隆性| 多克隆
抗体形式| 完整IgG分子
免疫原表位| 人BRD2蛋白第675至725位氨基酸区域(参照NP_005095.1)
亚型| IgG
标记物| 无标记(非偶联)
纯度| 抗原亲和纯化
浓度| 200 µg/mL
缓冲液体系| Tris缓冲盐水,含0.1% BSA及0.09%叠氮化钠
储存条件| 2 – 8 °C(请勿冷冻)
保质期| 自收货之日起1年
3. 产品制备与质控
纯化工艺:采用固相载体固定BRD2特异性表位肽段,进行亲和层析纯化,确保仅富集识别目标区域的高亲和力抗体。
表位定位:本抗体(货号A302-583A)识别的表位位于人BRD2蛋白第675至725位氨基酸之间(参考NP_005095.1及GeneID 6046)。
浓度测定:免疫球蛋白浓度依据比尔-朗伯定律测定,其中1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光值(A280)为1.4。
4. 推荐工作稀释度
以下稀释度基于标准实验条件确立,具体用量需根据样品类型及实验体系进一步优化:
应用方法 | 推荐稀释度/用量 | 备注
Western Blot(WB)| 1:2,000 – 1:10,000 | 使用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液,一抗孵育过夜。检测细胞裂解物时推荐使用抗兔IgG H&L链二抗(如A120-101P)。
Immunohistochemistry(IHC)| 1:100 – 1:500 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)进行抗原修复(适用于FFPE组织切片)。
Immunoprecipitation(IP)| 6 µg/mg 裂解物 | 免疫沉淀后WB检测时,建议使用抗兔IgG轻链HRP标记二抗,并在封闭液中添加5%正常猪血清(Cat. No. S100-020)以消除重链干扰。
5. 靶标生物学背景
BRD2(含溴结构域蛋白2)属于溴结构域和额外末端(BET)蛋白家族成员,该家族包括BRD2、BRD3、BRD4和BRDT。BRD2是一种核仁有丝分裂原激活激酶,在细胞周期调控基因的转录中发挥核心作用。
BRD2的功能机制:
转录衔接蛋白:BRD2通过其溴结构域识别并结合组蛋白H3/H4乙酰化赖氨酸残基,作为衔接蛋白将E2F转录因子及染色质重塑复合物招募至E2F应答元件,从而激活细胞周期相关基因(如Cyclin D1、Cyclin E1)的转录。
细胞周期调控:BRD2表达在细胞周期中受到严格调控,其活性对有丝分裂进程至关重要。研究发现BRD2与Rb/E2F通路密切协同,参与G1/S期转换的精细调控。
临床相关性:BRD2在多种肿瘤(包括血液系统恶性肿瘤及实体瘤)中过表达或功能失调,使其成为表观遗传靶向治疗的关注热点。BRD2基因位于主要组织相容性复合体(MHC)II类区域,也被认为与自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮)易感性相关。本抗体能够有效检测内源性BRD2蛋白水平及分布,适用于表观遗传调控、细胞周期机制及肿瘤药理研究。
6. 使用与储存注意事项
1. 储存:请于 2–8 °C 避光保存。切勿冷冻,以免抗体变性或聚合。
2. 稳定性:在推荐储存条件下,自收货之日起1年内稳定有效。
3. 防腐剂提示:缓冲液含0.09%叠氮化钠及0.1% BSA。叠氮化钠对呼吸系统及黏膜有刺激性,操作时请穿戴适当防护装备。若需进行抗体偶联标记,请预先透析去除叠氮化钠。
4. 种属交叉性:已验证可识别人及小鼠来源的BRD2。用于其他种属时建议预先验证。
5. 信号检测建议:BRD2分子量约为88 kDa,在WB中可能出现因磷酸化修饰导致的迁移条带(~80-90 kDa范围),建议设置阳性对照(如HeLa或HEK293T细胞裂解物)以确认目标条带位置。
*本说明书仅供研究使用,不适用于诊断或治疗程序。