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武汉艾美捷科技有限公司

主营产品:生化试剂和抗体 蛋白

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重组人DPP4蛋白,支持高通量酶动力学及IC50测定实验方案
发布日期:2026/8/24 15:16:07发布人:武汉艾美捷科技有限公司阅读量:1

1. 产品概述

由艾美捷代理BPS Biosciences推出的重组人二肽基肽酶4(Dipeptidyl Peptidase 4, DPP4)(货号:80040),又称CD26或腺苷脱氨酶复合蛋白2,由Sf9昆虫细胞表达系统生产,覆盖人DPP4全长胞外区(氨基酸29–766),C端携带6×His标签,经亲和层析纯化,适用于酶动力学研究、抑制剂筛选及选择性谱分析等体外实验场景。

项目 | 规格

构建体 | DPP4(29–766端)-His

标签 | C端His标签(6×His)

宿主/表达系统 | Sf9昆虫细胞

分子量 | 87 kDa

纯度 | ≥90%

比活力 | ≥4,000 pmol/min/µg

剂型 | 水相缓冲液

保存稳定性 | -80°C下至少6个月

 

2. 背景与功能

DPP4是一种丝氨酸外肽酶,可特异性切除多肽N端倒数第二位为脯氨酸(X-Pro)或丙氨酸(X-Ala)的二肽。其在体内具有双重功能:

酶催化功能:降解肠促胰素(如GLP-1、GIP),是血糖调控的关键负调节因子;

非酶功能:作为T细胞活化抗原CD26,参与免疫突触形成、信号转导及细胞凋亡调控。

因此,DPP4不仅是2型糖尿病治疗的重要靶点(如西格列汀等抑制剂),也在肿瘤免疫、炎症反应及自身免疫性疾病研究中受到广泛关注。

 

3. 产品设计与质量控制

3.1 构建体设计  

选取人DPP4胞外段(29–766位氨基酸),缺失跨膜区以增强溶解性,同时保留完整催化结构域。C端His标签便于通过固定化金属亲和层析(IMAC)纯化,且不影响酶活性。

3.2 纯度与活力  

SDS-PAGE鉴定纯度≥90%,无显著降解条带。  

比活力≥4,000 pmol/min/µg(采用BPS Bioscience #80204试剂盒,以Gly-Pro-AMC为底物测定),确保批次间一致性。

3.3 缓冲体系  

组成为45 mM Tris-HCl(pH 8.0)、124 mM NaCl、2.4 mM KCl、可变浓度咪唑及10%甘油。高盐和甘油有助于维持蛋白构象稳定,pH 8.0为酶活最适区间。

 

4. 使用与保存指南

4.1 操作步骤  

1. 冰上解冻,轻柔混匀(严禁涡旋振荡,避免机械剪切导致蛋白聚集);  

2. 解冻后快速离心(10,000×g,10秒)以收集管壁液滴;  

3. 按单次实验用量分装,剩余部分立即液氮速冻后返回-80°C长期保存;  

4. 避免反复冻融(每循环活力损失约10–15%)。

4.2 应用建议  

酶动力学:推荐反应缓冲液为20 mM Tris-HCl(pH 8.0),底物浓度梯度1–500 µM,反应时间30分钟,终止后荧光检测(Ex/Em = 360/460 nm)。  

抑制剂筛选:阳性对照可选用西格列汀(IC₅₀ ≈ 10–20 nM),需设置预孵育步骤(酶+抑制剂,37°C,10分钟)以确保充分结合。  

选择性谱分析:建议与其他丝氨酸蛋白酶(如FAP、PREP)进行交叉反应性比对。

 

5. 注意事项

运输与接收:干冰运输,到货后立即存于-80°C。避免存放于自动除霜冰箱中。  

安全性:本品仅供研究用途(Research Use Only),不可用于临床诊断或治疗。  

废液处理:含咪唑的缓冲液需按实验室生物废弃物规范处理。

 

6. 参考文献

1. Deacon CF, Carr RD, and Holst JJ Front Biosci. 2008 Jan 1;13:1780-94.

2. Langley AK, Suffoletta TJ, and Jennings HRPharmacotherapy. 2007 Aug;27(8):1163-80.

 

总结:本产品提供高纯度、高比活性的重组人DPP4蛋白,适用于酶学及药物筛选研究。严格遵循操作指南可最大化实验重现性与数据可靠性。如有特殊应用需求(如定制缓冲液交换),建议与供应商沟通预处理方案。



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