Z-Phe-Arg-4MβNA·HCl（CAS：100900-17-2）是一类4MβNA（4-甲氧基-β-萘胺）标记的多肽荧光底物，结构由三部分构成：
● Z-：N端保护基，构成底物结构的一部分
● Phe-Arg：经典的Cathepsin B/L识别序列
● 4MβNA：被酶切释放后产生荧光信号的报告基团
具体工作原理如下：
● 在合适的缓冲条件下，Cathepsin B/L/S等半胱氨酸蛋白酶识别Phe-Arg序列，并在Arg位点附近切割。
● 酶切后释放4MβNA，并在相应检测体系中产生可检测的荧光信号，从而用于反映蛋白酶活性。
● 通过监测检测信号的变化，可对底物水解程度及蛋白酶活性进行分析。
简单来说：酶越活跃，切得越快，荧光信号越强。 加入候选抑制剂后，可通过检测信号变化评价其对蛋白酶活性的影响。
由于P1位是Arg，底物也能被部分胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶（Trypsin-like Proteases）识别，包括：
● 血浆激肽释放酶（Plasma Kallikrein）
● 纤溶酶（Plasmin）
● 胰蛋白酶（Trypsin）
● 其他Arg特异性丝氨酸蛋白酶
因此，Z-Phe-Arg-4MβNA底物，可以同时服务于组织蛋白酶家族和胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶两套检测体系。