引言：cGAS-STING 通路关键第二信使的定量需求

2‘3’-cGAMP（2‘3’-环磷酸鸟苷-腺苷）是哺乳动物细胞质内 DNA 感受器 cGAS 被异常 DNA 激活后合成的第二信使，能够以纳摩尔级亲和力结合 STING 蛋白，启动 I 型干扰素和促炎性细胞因子的表达。该分子在抗病毒免疫、抗肿瘤免疫、自身炎症性疾病及细胞衰老等多种生理病理过程中发挥核心调控作用。准确检测细胞、血浆、血清及组织样本中 2‘3’-cGAMP 的浓度，对于理解 cGAS-STING 通路的激活状态、评估候选药物的靶向调控效果以及探索疾病生物标志物具有重要意义。

由艾美捷代理Cayman 公司推出的 2‘3’-cGAMP ELISA 试剂盒（货号：501700）是一种竞争性酶联免疫检测试剂盒，专用于细胞裂解液、血浆、血清和组织样本中 2‘3’-cGAMP 的定量分析。该试剂盒检测范围宽（6.1 pg/ml - 100 ng/ml），灵敏度高（80% B/B₀ 约 85 pg/ml），可覆盖从健康基线到强激活状态下的浓度区间。本文将从产品描述、检测原理、技术规格、样本处理及使用注意事项等方面对该试剂盒进行系统性介绍。

产品描述与检测原理

2‘3’-cGAMP ELISA 试剂盒采用竞争性酶免疫分析（EIA）原理。微孔板中预包被有抗 2‘3’-cGAMP 抗体。检测时，将标准品或待测样本与固定量的酶标抗原（2’3‘-cGAMP-乙酰胆碱酯酶结合物）共同加入孔中。样本中的游离 2’3‘-cGAMP 与酶标抗原竞争结合抗体上的有限结合位点。洗涤去除未结合物质后，加入 Ellman’s 试剂（含乙酰硫代胆碱和显色剂）。结合在孔板上的酶标抗原催化底物水解生成黄色产物，在 412 nm 处产生特征吸收峰。样本中 2‘3’-cGAMP 浓度越高，竞争占据的抗体位点越多，最终结合的酶标抗原越少，显色越浅，吸光度越低。通过已知浓度的标准品绘制标准曲线（吸光度 vs. 浓度，四参数逻辑拟合），即可计算待测样本中 2‘3’-cGAMP 的含量。

技术规格

参数 详细信息

检测方法 竞争性酶免疫分析（EIA）

样本类型 细胞裂解液、血浆、血清、组织样本

检测范围 6.1 pg/ml - 100 ng/ml（9 pM - 148.3 nM）

中点（50% B/B₀） 约 900 pg/ml（1,335 pM）

灵敏度（80% B/B₀） 约 85 pg/ml（126 pM）

检测限（LOD） 9.6 pg/ml（14.2 pM）

抗体来源 动物来源（牛、兔）

储存温度 4°C

运输条件 美国大陆地区湿冰运输；其他地区可能不同

许可/合作方 BIOLOG Life Science Institute

警告 不适用于人类或兽医用途

样本类型与前处理建议

适用样本类型

细胞裂解液：贴壁或悬浮细胞经 PBS 洗涤后，使用裂解缓冲液（如 RIPA 或试剂盒推荐的裂解液）裂解，离心取上清。建议测定蛋白浓度以进行归一化（如 pg 2‘3’-cGAMP/mg 总蛋白）。

血浆：使用 EDTA、肝素或柠檬酸钠抗凝采血，离心分离血浆。避免溶血，溶血样本可能释放细胞内的 cGAMP 导致结果偏高。

血清：全血自然凝固后离心获得血清。注意血清中可能含有较低水平的 cGAMP，需设置相应基质对照。

组织样本：匀浆后离心取上清。建议在裂解缓冲液中加入蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂，减少样本降解。

样本前处理注意事项

1. 基质效应：不同样本基质（如血浆蛋白、脂质、裂解液成分）可能影响抗体结合效率。建议对标准品使用与待测样本相同或相似的稀释液（如试剂盒提供的缓冲液或基质匹配的空白裂解液）。

2. 稀释方案：若样本浓度超出标准曲线上限（>100 ng/ml），建议用试剂盒提供的样本稀释缓冲液进行 2-100 倍稀释后重新检测，并将结果乘以稀释因子。若浓度低于检测下限（<9.6 pg/ml），可报告为“低于检测限”或通过浓缩样本提高检测能力。

3. 稳定性：样本收集后应尽快检测或分装后储存于 -80°C。避免反复冻融，以免 2‘3’-cGAMP 降解。

储存与运输要求

储存温度：4°C。所有组分（包括包被板、标准品、酶标抗原、缓冲液、Ellman’s 试剂等）均应于 4°C 冷藏保存。请勿冷冻，冷冻可能导致抗体失活或试剂分层。

运输条件：美国大陆地区采用湿冰运输；其他地区可能有所不同。收货后请立即检查包装完整性，并按说明书要求将各组分转移至 4°C。

应用领域

应用领域 说明

cGAS-STING 通路激活状态评估 定量检测细胞或组织中内源性 2‘3’-cGAMP 水平，反映 cGAS 活性

药物筛选 评估 cGAS 抑制剂、STING 激动剂/拮抗剂对 2‘3’-cGAMP 产生的影响

病毒感染研究 监测 DNA 病毒（如 HSV、HPV、VACV）感染后细胞中 cGAMP 的动态变化

肿瘤免疫与放疗/化疗 检测放疗、化疗或免疫治疗后肿瘤组织中 cGAMP 的诱导水平

自身炎症疾病模型 测量 cGAS 过度激活相关疾病（如 Aicardi-Goutières 综合征）模型中的 cGAMP 浓度

生物标志物开发 探索血浆/血清中 2‘3’-cGAMP 作为疾病活动度或治疗应答的生物标志物

部分文献参考：

Fréreux, C., Karam, J.A.Q., Howley, B.V., et al. PCBP1 binding to single-stranded poly-cytosine motifs enhances cGAS sensing and impairs breast cancer development. Commun. Biol. 9(1), 179 (2026).

Fréreux, C., and Howe, P.H. ELISA-based enzyme kinetics assay for measuring cGAS activity. Bio. Protoc. 16(7), e5655 (2026).

Chen, M., Li, Y., Zhu, J.-Y., et al. Exercise-induced adipokine Nrg4 alleviates MASLD by disrupting hepatic cGAS-STING signaling. Cell Rep. 44(2), 115251 (2025).