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上海创赛科技有限公司

主营产品:3-溴噻吩,N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺,牛磺胆酸钠

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Suc-AAPF-pNA 高纯底物|组织蛋白酶 G、糜蛋白酶比色法检测专用显色底物
发布日期:2026/7/24 16:34:46发布人:上海创赛科技有限公司阅读量:6

PC18650.jpg

名称:Suc-AAPF-pNA 

品牌: Medlife

CAS号:70967-97-4

纯度:  ≥98%

货号:PC18650

规格:10mg/价格:¥408.00

规格:25mg/价格:¥740.00

规格:100mg/价格:¥2445.00

链接:https://www.med-life.cn/product/580285.html


一、产品简介

Suc-AAPF-pNA(N - 琥珀酰 - Ala-Ala-Pro-Phe - 对硝基苯胺),CAS No.:70967-97-4,分子式 C₃₀H₃₇N₇O₉,分子量 639.66,本品为HPLC≥98%高纯多肽显色底物试剂。采用固相多肽合成、树脂裂解、液相纯化、反相制备色谱精制、低温避光真空干燥、惰性气体密封分装工艺制备,严格管控缺失肽、游离 pNA、多肽异构体、重金属、残留有机溶剂与水解杂质,确保多肽序列完整、酶切响应活性稳定、空白水解率低、批次检测重复性高度统一。本品外观为白色至类白色结晶粉末,无结块、无杂色、无异味;易溶于 DMSO、DMF,可缓冲液助溶;水溶液中性条件下相对稳定,在目标蛋白酶催化位点发生特异性切割,释放黄色对硝基苯胺(pNA),可通过 405 nm 紫外比色定量;具备底物特异性强、本底水解低、检测线性范围宽等特点。
本品广泛应用于糜蛋白酶、组织蛋白酶 G 酶活测定、丝氨酸蛋白酶抑制剂筛选、蛋白酶动力学参数测定、炎症相关蛋白酶机制研究、高通量药物筛选、酶学方法学验证、高校生物化学科研实训等酶工程、药理学、炎症生物学领域。产品密封 - 20℃避光干燥保存,防潮、避光、隔绝水汽,避免高温、强酸强碱与强氧化剂接触,规范储存条件下保质期 24 个月。

区别于普通低纯度多肽底物,本品缺失肽杂质少、自发水解极低、酶切特异性优异,空白背景信号低,无需二次纯化,可直接用于精密酶动力学实验与高通量抑制剂筛选,是糜蛋白酶、组织蛋白酶 G 活性定量领域标杆级显色多肽底物。


二、作用机制

1、位点特异性酶切显色机制
Suc-AAPF-pNA 末端连接生色基团 pNA,完整多肽无明显黄色;糜蛋白酶、组织蛋白酶 G 特异性识别 Ala-Ala-Pro-Phe 序列,在苯丙氨酸 C 端位点切断肽键,释放游离对硝基苯胺;游离 pNA 在 405 nm 具有特征吸收,吸光度变化与酶活性正相关,实现蛋白酶活性定量检测。
2、低自发水解维稳机制
多肽经过深度纯化,去除短肽杂质与游离 pNA,中性缓冲体系中非酶促自发水解速率极低,空白背景值小,大幅提升检测信噪比,适合长时间动力学连续监测。
3、酶动力学参数测定机制
底物可配置梯度浓度溶液,用于测定 Km、Vmax 等动力学常数,评价蛋白酶催化效率;同时可建立竞争抑制模型,评估小分子化合物对丝氨酸蛋白酶的抑制活性。
4、高通量筛选适配机制
水溶性与有机助溶剂兼容性良好,DMSO 耐受度高,适配微孔板高通量体系,适合大批量蛋白酶抑制剂、激活剂化合物筛选。
5、生物体系温和兼容机制

多肽底物理化性质温和,不直接抑制多种蛋白酶,不产生非特异性蛋白变性,可在生理 pH 区间构建体外酶促反应模型,模拟胞外蛋白酶炎症相关作用通路。


三、主要应用领域

1、糜蛋白酶体外酶活定量检测
作为标准显色底物,测定 α- 糜蛋白酶、β- 糜蛋白酶催化活性,用于酶制剂活力标定、工艺优化。
2、组织蛋白酶 G 活性分析
用于中性粒细胞来源组织蛋白酶 G 活性测定,支撑炎症、免疫相关病理机制研究。
3、丝氨酸蛋白酶抑制剂高通量筛选
构建微孔板比色模型,筛选天然产物、合成小分子蛋白酶抑制剂,开发抗炎候选药物。
4、酶动力学与抑制机理研究
测定蛋白酶 Km、Ki 等动力学参数,阐明化合物竞争性 / 非竞争性抑制作用模式。
5、蛋白酶稳定性与生化方法开发
用于缓冲体系、温度、pH 条件优化,建立标准化蛋白酶检测方法学。
6、生物化学科研与教学实训

适配酶促反应、蛋白酶动力学、抑制剂筛选教学实验,显色信号稳定,实验重复性优异。


四、使用方法与注意事项

使用方法

酶活检测实验:精密称量 Suc-AAPF-pNA,无水 DMSO 配制 10–20 mM 储备液,避光保存;按照实验方案稀释至缓冲体系,加入蛋白酶样品,恒温孵育,酶标仪 / 分光光度计持续监测 405 nm 吸光度变化,计算酶活力;
抑制剂筛选实验:梯度配置待测化合物,与蛋白酶预孵育后加入底物启动反应,对比吸光度变化评估抑制效果;
动力学实验:设置一系列底物浓度,采集反应初始速率,拟合计算动力学参数。

注意要点

多肽底物遇光、高温易缓慢水解,粉末与工作溶液全程避光操作;
水溶液稳定性较差,底物工作液建议现配现用,不宜长时间常温放置;
储备液建议分装冻存,避免反复冻融造成多肽降解,提升空白水解值;
操作佩戴防尘口罩、手套、护目镜,避免粉尘吸入与皮肤黏膜接触;
仅限实验室体外酶学科研、高通量筛选使用,严禁人体注射、口服、体内直接给药;
粉末出现明显发黄、配制底物溶液空白吸光度持续偏高,代表多肽降解,禁止用于定量酶活实验;

本品高纯多肽规格,游离 pNA 杂质控制严格,溶解后可直接投入酶促反应体系。


五、总结与展望

高纯 Suc-AAPF-pNA 依托序列特异性强、本底自发水解低、405 nm 比色检测便捷、DMSO 兼容性好、适配高通量筛选等核心优势,成为糜蛋白酶、组织蛋白酶 G 活性测定、丝氨酸蛋白酶抑制剂筛选领域核心标准化显色多肽底物。有效解决粗品多肽底物杂质高、空白水解严重、检测背景偏高、动力学数据重复性差等行业痛点,全面满足高校酶学实验室、新药筛选平台、蛋白制剂研发机构、炎症药理研究院各类科研需求。
依托本品搭建的蛋白酶酶活检测体系、抑制剂高通量筛选平台、酶动力学评价模型,广泛支撑蛋白酶制剂开发、抗炎药物筛选、中性粒细胞炎症机制、丝氨酸蛋白酶病理功能等科研项目。随着炎症药理、蛋白酶靶向药物、高通量体外筛选技术持续发展,高纯 Suc-AAPF-pNA 将在酶工程、生物化学、药理筛选领域持续发挥关键作用,为蛋白酶活性定量、抑制剂机制研究提供酶切活性稳定、纯度可控、批次高度统一的标准化显色多肽底物保障。




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