名称:荧光素二乙酸盐
品牌:PERFEMIKER
CAS号:596-09-8
货号:PN05986
规格:500g/纯度:>98%/价格:¥5000.00
规格:1kg/纯度:>98%/价格:¥9200.00
链接:https://www.perfemiker.cn/product/2001448.html
一、产品简介
荧光素二乙酸盐（FDA），属于非荧光型酯酶底物探针，产品经纯化处理，杂质控制严格，外观多为淡黄色结晶粉末。该化合物本身无荧光，可自由穿透完整活细胞膜，进入胞内被酯酶水解，生成具有强绿色荧光的荧光素，广泛应用于活细胞标记、细胞活力评价相关实验。本品易溶于丙酮、DMSO 等有机溶剂，几乎不溶于水。建议‑20℃密封避光干燥保存，水溶液现配现用。本品仅用于实验室体外科学研究，不可用于人体临床诊断与体内给药。
二、作用机制
细胞膜穿透机制：荧光素二乙酸盐为脂溶性分子，能够透过活细胞完整的细胞膜进入细胞内部，死细胞细胞膜破损，染料易发生外泄，无法滞留荧光信号。 酯酶水解激活荧光机制：活细胞内存在内源酯酶，可水解 FDA 分子上的乙酰基团，脱去乙酸基团生成水溶性荧光素，在 488 nm 激发下产生绿色荧光，实现活细胞荧光标记。 细胞活力判别机制：活细胞具备正常酯酶活性与完整细胞膜，能够滞留荧光素发出荧光；凋亡、坏死细胞酯酶失活或膜结构破坏，无法积累荧光产物，以此区分活细胞与死细胞。 降解失活机制：光照条件下染料易发生光降解；水溶液状态极易水解，提前水解会造成背景荧光升高，干扰实验结果；高温会加速染料结构破坏，降低染色性能。
三、主要应用领域
1、活细胞荧光染色实验
用于悬浮细胞、贴壁细胞的活细胞荧光标记，荧光显微镜、共聚焦成像观测。
2、细胞活力检测评价
结合其他染料开展细胞存活率分析，用于药物毒性、化合物细胞毒性筛选。
3、微生物活性检测
检测细菌、真菌等微生物活体细胞，评价微生物活性状态。
4、植物原生质体活力测定
植物原生质体的存活状态检测，用于植物细胞生物学相关研究。
5、流式细胞分析实验
作为荧光底物，用于流式平台开展活细胞比例检测分析。
6、高校科研教学实训
细胞生物学、药理学相关染色实验教学与课题研究。
四、使用方法与注意事项
使用方法：样品室温平衡后，避光条件下使用 DMSO、丙酮配制高浓度母液；按照实验体系稀释至工作浓度，加入细胞样本体系孵育；孵育完成后使用荧光显微镜或流式设备采集绿色荧光信号；母液避光分装冻存，避免反复冻融。 注意要点：染料对光敏感，全部操作尽量避光；水溶液不能长期存放，必须现配现用；根据细胞类型摸索合适孵育浓度与孵育时间，过高浓度会产生非特异性背景；操作佩戴手套护目镜，避免粉末接触皮肤黏膜；废液按照有机生化危废处置；如母液颜色改变、染色几乎无信号，提示染料降解失效，不适合定量实验；仅限体外科研使用，禁止临床及活体应用。
五、总结与展望
荧光素二乙酸盐（FDA）凭借脂溶性跨膜特性以及胞内酯酶激活荧光的特点，是经典的活细胞示踪与细胞活力检测工具染料，操作简便，适配荧光显微、流式细胞仪多种检测平台，广泛用于细胞毒性筛选、微生物及植物细胞活性评估。 随着细胞生物学、药物筛选领域的持续发展，该试剂可为各大高校、科研院所、生物医药研发企业提供稳定可靠的荧光探针原料，助力细胞存活、药物毒性机制相关科研工作。