
名称:BCECF AM pH 荧光指示剂(5mM,绿色)
品牌: Medlife
CAS号:117464-70-7
纯度: N/A
货号:PR01182
规格:50μL/价格:¥518.00
链接:https://www.med-life.cn/product/1296726.html
一、产品简介
BCECF AM pH 荧光指示剂(5 mM,绿色),本品为预配浓缩荧光探针溶液,采用高纯 BCECF AM 单体溶于无水 DMSO 配制而成,严格管控水解杂质、游离荧光母核、微量金属杂质,批次染料纯度、脂膜穿透能力、pH 响应灵敏度、荧光稳定性、实验重复性高度统一。BCECF AM 为乙酰甲酯修饰型 pH 敏感荧光探针,脂溶性 AM 酯键赋予分子细胞膜穿透能力;进入活细胞后,胞内酯酶水解切除 AM 基团,释放水溶性 BCECF,滞留于细胞质内,实现胞内 pH 实时检测。成品为 DMSO 澄清溶液,激发发射为绿色荧光波段,可采用比率法消除染料装载不均、光漂白带来的误差。产品密封避光、-20℃冷冻保存,避免反复冻融、水汽侵入引发提前水解,规范储存条件下染料细胞膜穿透性能与 pH 响应特性长期稳定。 本品为即用型浓缩母液,无需自行溶解配制,可直接稀释用于活细胞胞内 pH 成像、流式检测,是细胞生理学、离子信号、活细胞成像实验室标准化胞内 pH 荧光检测试剂。
二、作用机制
脂溶性胞内递送机制:AM 乙酰甲酯封闭分子极性电荷,探针具备脂溶性,自由穿透完整活细胞膜;胞内酯酶催化水解 AM 酯基,生成带负电的 BCECF 阴离子,无法透出细胞膜,长久滞留细胞质。 pH 依赖性荧光响应机制:BCECF 荧光光谱受氢离子浓度调控,pH 升高荧光增强,pH 降低荧光减弱,可采用双激发比率法采集信号,规避染料负载差异、细胞厚度、光漂白造成的定量偏差。 可逆质子传感机制:探针与 H⁺可逆结合,不破坏细胞内酸碱稳态,可动态追踪活细胞 pH 实时波动。 绿色荧光兼容机制:绿色荧光通道,可与远红、红色荧光探针搭配开展多色共染实验,适合与离子探针、活死细胞染料联合检测。 低细胞扰动机制:工作浓度下细胞毒性低,短时间孵育不会显著干扰细胞基础代谢与膜转运功能。
三、主要应用领域
1、活细胞胞内 pH 动态实时成像
共聚焦显微镜、高内涵系统监测细胞稳态、刺激条件下细胞质 pH 变化。
2、离子通道与质子转运蛋白功能研究
探究 Na⁺/H⁺交换体、质子泵等转运体介导的胞内酸碱调节机制。
3、药物干预胞内酸碱平衡体外实验
评价小分子化合物对细胞内 pH 稳态的干扰作用。
4、流式细胞术胞内 pH 批量检测
高通量分析药物处理后细胞群体胞内 pH 分布差异。
5、缺氧、氧化应激条件下细胞酸碱响应
研究病理模型中代谢改变诱发的胞内酸化现象。
6、细胞生理学教学实训
活细胞荧光离子传感、胞内 pH 检测对照实验,响应线性区间宽,重现性良好。
四、使用方法与注意事项
使用方法:根据细胞体系吸取适量 5 mM 母液,加入无血清培养基稀释至工作浓度;37℃避光孵育装载探针,装载结束后洗涤去除胞外残留染料;成像全程避光,设置合适激发参数,采用比率法进行定量分析;本品可直接稀释使用。 注意要点:母液遇水易水解,取用过程避免接触水汽;反复冻融会加速探针降解,建议分装保存;全程避光操作,减少光漂白;仅限实验室体外活细胞科研实验使用,不可用于临床诊断;废液按照荧光有机试剂危废统一处置;若染料溶液浑浊、装载后细胞无明显绿色荧光、pH 响应消失,判定探针水解失效,禁止用于胞内 pH 定量实验;批次纯度、水解活性、pH 响应指标严格质控,实验数据稳定可控。
五、总结与展望
5 mM BCECF AM 绿色 pH 荧光指示剂凭借可穿透活细胞膜、胞内酯酶激活滞留、支持比率法定量、pH 响应区间贴合生理胞内环境、绿色荧光易于多色搭配等核心优势,解决游离 BCECF 无法透过细胞膜、仅能检测胞外 pH、难以实现活细胞动态定量检测的科研痛点,是胞内酸碱平衡、质子转运机理研究领域经典荧光指示剂。 当前依托 BCECF AM 搭建的胞内 pH 成像、转运蛋白功能筛选科研体系,持续支撑肿瘤代谢、上皮离子转运、神经细胞生理调控等热门课题。随着活细胞实时荧光成像技术持续发展,BCECF AM pH 荧光指示剂(5mM,绿色)将持续为高校、科研院所、生物医药研发企业开展活细胞酸碱信号研究,提供响应稳定、批次可控的标准化胞内 pH 检测探针保障。