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细胞鉴定：PCR，测序
质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性
修饰类型：敲除
转导方法：蛋白法
抗性基因：—
克隆类型：纯合子
细胞冻存或复苏发货
本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。
收到细胞后请务必仔细阅读产品资料，了解细胞相关信息，如贴壁特性 (贴壁/悬浮/半贴壁半悬浮)、细胞形态、培养体系、传代比例和换液频率等。
可广泛应用于以下研究领域：
基因功能研究： 过表达或敲低目标基因，研究其功能及调控机制。
药物筛选与评价： 构建药物靶点稳转细胞株，用于高通量药物筛选和药效评价。
蛋白表达与纯化： 高效表达目标蛋白，用于蛋白结构、功能研究和药物开发。
疾病模型构建： 构建疾病相关基因稳转细胞株，用于疾病机制研究和药物开发。
操作步骤
细胞培养:使用适当的培养基和条件培养宿主细胞，确保细胞处于最佳生长状态。
转染:将含有目标基因的载体通过转染试剂（如Lipofectamine）导入宿主细胞。根据载体类型选择合适的转染方法（如化学转染、电穿孔等）。
筛选:转染后24-48小时，加入筛选药物（如G418、Puromycin等）进行筛选。持续筛选2-3周，直至未转染细胞全部死亡。
单克隆筛选:将存活的细胞进行有限稀释，接种到96孔板中，培养至单克隆形成。挑选高表达目标蛋白的单克隆进行扩增。
验证:通过PCR、Western Blot等方法验证目标基因的整合和表达。检测目标蛋白的表达水平和功能活性。
冻存:将验证后的稳转株细胞进行冻存，建立细胞库。
载体信息:
筛选药物浓度:
G418: 200-1000 μg/mL
Puromycin: 1-10 μg/mL
Hygromycin: 50-500 μg/mL
注意事项
细胞状态: 确保细胞在转染前处于最佳生长状态，避免使用老化或污染的细胞。
转染效率: 不同细胞系的转染效率差异较大，需优化转染条件。
筛选药物: 筛选药物的浓度需根据细胞系和载体进行优化，避免过度筛选导致细胞死亡。
单克隆筛选: 单克隆筛选是获得高表达稳转株的关键步骤，需耐心细致操作。
冻存与复苏: 冻存和复苏过程中需严格控制温度和时间，避免细胞损伤。
雅吉生物产品全部优惠价供应，京津冀、江浙沪皖、川渝地区通常到货时间为次日达。其它主要大中城市到货时间为隔日达(周末和节假日除外)。
五、 联系我们
产品仅用于科研用途，不得用于临床诊断或治疗。
Q1: 如何选择合适的稳转细胞株？
Q2: 如何验证稳转细胞株的表达？
Q3: 稳转细胞株可以传代多少次？
[雅吉生物]致力于为您提供高质量的科研工具和服务，助力您的研究取得成功！