总巯基测定试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质，而且参与活性氧清除，后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量，能够间接测定蛋白质巯基含量。
测定原理：
巯基基团与5,5’- 二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在412nm处有最大吸收峰。
组成：
产品名称 | AO011-50T/24S | Storage |
试剂一：液体 | 40ml | 4℃ |
试剂二：液体 | 2ml | 4℃避光 |
说明书 | 一份 |
自备仪器和用品：
天平、研钵、可见分光光度计、恒温水浴锅、1ml玻璃比色皿、乙醇和蒸馏水。
样品的制备：
按照组织质量（g）：水体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清，培养液：稀释5倍后测定，可取0.1ml样本，加入0.4ml蒸馏水，混匀，置冰上待测。
测定操作表：
1、分光光度计预热30min，调节波长至412nm，双蒸水调零。
2、操作表
在1ml玻璃比色皿中加入如下试剂
| 对照管 | 测定管 |
样品（μl） | 200 | 200 |
试剂一（μl） | 750 | 750 |
试剂二（μl） |
| 50 |
乙醇（μl） | 50 |
|
混匀，25℃静置10min， 测定412nm吸光值，ΔA=A测定-A对照。每个测定管设一个对照管。 |
计算公式：
总巯基标准曲线：y =3.6222 x- 0.0037，R2 = 1，x为标品浓度，单位μmol/ml， y为吸光度ΔA。
1. 组织：
（1）按样本重量计算
总巯基含量（μmol/g 鲜重）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×V样总÷W
=0.276×（ΔA+0.0037）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
总巯基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×V样总÷Cpr
=0.276×（ΔA+0.0037）÷Cpr
2. 血清、培养液：
总巯基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×5×103
=1380×（ΔA+0.0037）
V样总：加入提取液体积，1ml；W：样品质量，g ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；5：血清，培养液等液体样本稀释倍数；103 ：1mmol/L=103μmol/ L
注意事项：
最低检出限为10μmol/L。
关键字： 总巯基测定试剂盒;
伊势久（江苏连云港）生物科技有限责任公司，成立于2019年，坐落于新亚欧大陆桥东方桥头堡连云港市。公司由资深行业专家和双一流高校博士联合创办，主要从事生化检测、病理检测和原料酶等相关试剂的研发和生产。
我司位于联东U谷科技创新谷内的2000平米的生产、研发基地已建成投入运行，其中包括150平米的超十万级的洁净车间。我司坚持以自主研发为核心，现已生产出的脲酶、tRNA转运核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制剂等产品，热销市场以来收到了客户的广泛好评。
公司秉承“ 挚诚科研、匠心传承” 的发展理念，聚焦于前沿生物技术的应用和创新，努力成为生物科技领域的标杆企业。坚持以客户为中心，致力于为中国的科研工作者提供高品质的产品和专业服务，始终是我们努力的目标和方向。