来源：分离自沙门氏菌噬菌体 SP6（Salmonella phage SP6），属于单亚基 RNA 聚合酶家族。
分子特性：
分子量：约 94 kDa，由约 830 个氨基酸残基组成。
结构域：包含 N 端的 DNA 结合结构域（识别 SP6 启动子）和 C 端的催化结构域（负责 RNA 链的延伸）。
辅助因子：需要镁离子（Mg²⁺）激活，依赖 ATP、GTP、CTP、UTP 作为底物。
体外转录：以含有 SP6 启动子序列的 DNA 为模板，特异性结合启动子（5'-ATTTAGGTGACACTATAG-3'），催化 RNA 链从 + 1 位起始合成。
产物类型：合成单链 RNA，包括正义 RNA（sense RNA）、反义 RNA（antisense RNA）、小干扰 RNA（siRNA）前体、信使 RNA（mRNA）等。
应用场景：
制备 RNA 探针（用于 Northern blot、原位杂交）；
合成体外翻译模板；
生产 siRNA 或 miRNA 用于基因沉默研究；
合成 CRISPR 实验所需的 gRNA。
高度特异性：仅识别 SP6 启动子的 17 bp 保守序列，与其他噬菌体聚合酶（如 T7、T3）的启动子无交叉反应。
高效性：在适宜条件下（37℃，优化缓冲液），可合成长达数 kb 的 RNA，产率高达 1 μg/μL 反应体系。
依赖模板结构：需 DNA 模板的启动子区域处于双链状态，且 RNA 合成方向为 5'→3'。
Origin: Isolated from Salmonella phage SP6, belonging to the single-subunit RNA polymerase family.
Molecular Features:
Molecular Weight: Approximately 94 kDa, composed of ~830 amino acid residues.
Structural Domains: Contains an N-terminal DNA-binding domain (recognizes SP6 promoter) and a C-terminal catalytic domain (mediates RNA chain elongation).
Cofactors: Requires magnesium ions (Mg²⁺) for activation and uses ATP, GTP, CTP, and UTP as substrates.
In Vitro Transcription: Uses DNA templates containing the SP6 promoter sequence, specifically binding to the promoter (5'-ATTTAGGTGACACTATAG-3') to initiate RNA synthesis from the +1 position.
Product Types: Synthesizes single-stranded RNA, including sense RNA, antisense RNA, siRNA precursors, and messenger RNA (mRNA).
Applications:
Preparation of RNA probes (for Northern blot, in situ hybridization);
Synthesis of templates for in vitro translation;
Production of siRNA/miRNA for gene silencing studies;
Generation of gRNA for CRISPR experiments.
High Specificity: Recognizes only the 17 bp conserved sequence of the SP6 promoter, with no cross-reactivity to promoters of other phage polymerases (e.g., T7, T3).
High Efficiency: Capable of synthesizing RNA up to several kilobases in length under optimal conditions (37℃, optimized buffer), with yields up to 1 μg/μL reaction volume.
Template Dependency: Requires the promoter region of the DNA template to be double-stranded, with RNA synthesis proceeding in the 5'→3' direction.
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