正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             
测定意义:
PAL(EC4. 3 1 5)广泛存在于各种植物和少数微生物中,是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶,与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关,在植物正常生长发育和抵御病菌侵害过程中起重要作用。
测定原理:
PAL催化L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在290nm处有最大吸收值,通过测定吸光值升高速率计算PAL活性。
组成:
| 产品名称 | SR013-50T/48S | Storage | 
| 提取液:液体 | 60ml | 4℃ | 
| 试剂一:液体 | 40ml | 4℃ | 
| 试剂二:粉剂 | 3瓶 | 4℃ | 
| 试剂三:液体 | 2.5ml | 4℃ | 
| 说明书 | 一份 | 
试剂二:粉剂×3瓶,4℃保存。临用前每瓶加入4ml蒸馏水水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存;
自备仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 ml石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取:
按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
| 试剂名称(μl) | 测定管 | 对照管 | 
| 样本 | 20 | 
 | 
| 试剂一 | 780 | 800 | 
| 试剂二 | 200 | 200 | 
混匀,30℃ 准确水浴30min
混匀,静置10min后,290nm处记录测定管吸光值A1和对照管吸光值A2,△A=A1-A2。
注意:对照管只要做一管
PAL活性计算:
- 按蛋白浓度计算 
单位定义:每mg组织蛋白在每ml反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.1为一个酶活性单位。
PAL(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(Cpr× V样)÷0.1÷T =17.3×ΔA÷Cpr
- 按样本鲜重计算 
单位定义:每g组织每ml反应体系中每min使290nm下吸光值变化0.1为一个酶活性单位。
PAL(U/g鲜重)=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.1÷T =17.3×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1.04ml; V样:加入样本体积,0.02ml;V样总:加入提取液体积,1 ml;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g;
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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                                伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司,成立于2019年,坐落于新亚欧大陆桥东方桥头堡连云港市。公司由资深行业专家和双一流高校博士联合创办,主要从事生化检测、病理检测和原料酶等相关试剂的研发和生产。
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