人血管内皮生长因子(VEGF)elisa试剂盒
1. 检测原理（双抗体夹心ELISA）
预包被捕获抗体：微孔板包被抗人VEGF单克隆抗体。
样本结合：VEGF蛋白与捕获抗体特异性结合。
检测抗体孵育：加入生物素或HRP标记的抗VEGF二抗，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。
信号放大与显色：链霉亲和素-HRP催化TMB显色（蓝色→黄色，终止后）。
定量分析：450nm测OD值，VEGF浓度与吸光度成正比。
产品名称 | 人血管内皮生长因子(VEGF)elisa试剂盒 | 英文名称 | VEGF Elisa Kit |
规格 | 48T\96T | 货号 | XG-EH0390 |
种属 | 人 | 用途 | 仅供科研实验 |
2. 试剂盒组成
组分 说明
预包被微孔板 96孔（可拆卸），包被抗VEGF单抗（如抗VEGF-A亚型）。
VEGF标准品 重组人VEGF蛋白（0、31.25、62.5、125、250、500、1000 pg/mL）。
检测抗体 生物素或HRP标记的抗VEGF二抗（识别不同表位）。
TMB显色液 避光保存，现用现配。
终止液 1M H?SO?。
洗涤缓冲液 20×浓缩PBS-Tween 20，需稀释使用。
样本稀释液 含蛋白稳定剂，减少基质效应。
3. 适用样本及处理
血清/血浆（EDTA/肝素抗凝）：离心（1000×g, 10min）去除纤维蛋白。
细胞上清：离心（300×g, 5min）去除细胞碎片。
组织匀浆：裂解后离心（12000×g, 15min）取上清。
稳定性：2-8℃保存≤24小时，长期需-80℃（避免反复冻融）。
4. 操作步骤（简化版）
加样：标准品/样本加入微孔板 → 37℃孵育2小时。
洗涤：洗板3次，去除未结合物。
加检测抗体：孵育1小时（37℃）。
信号放大（若适用）：加链霉亲和素-HRP，孵育30分钟。
显色：加TMB → 避光反应15分钟。
终止与检测：加终止液，450nm读值（参考630nm）。
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5. 关键性能参数
参数 指标
检测范围 15.6–1000 pg/mL（可稀释扩展）
灵敏度 <5 pg/mL
精密度 板内CV <8%，板间CV <12%
特异性 检测VEGF-A（165aa亚型），不结合PlGF或PDGF。
回收率 90–110%（血清/细胞上清验证）
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