羧酸酯酶(CarE)测定试剂盒/微量法/96S

羧酸酯酶(CarE)测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

哺乳动物 CarE ，也称脂族酯酶（aliesterase），广泛分布于组织和器官，属于丝氨酸水解酶家族。CarE 催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解，但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE 参与脂质运输和代谢，并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关，有机磷农药可结合并且抑制 CarE活性。

测定原理：

CarE 能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，固篮显色；在 450 nm光吸收增加速率， 计算 CarE 活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

测定步骤：
1. 分光光度计/酶标仪预热30min ，调节波长到 450 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二置于 37℃水浴中预热 30 min。

3. 空白管：取微量玻璃比色皿/96 孔板，依次加入 5μL 蒸馏水和 200μL 试剂二，迅速混匀，于 450nm 处测定 3min 内吸光值变化，第 10s 吸光值记为 A1 ，第 190s 吸光值记为 A2 。△A 空白管=A2-A1。

4. 测定管：取微量玻璃比色皿/96 孔板，依次加入 5μL 上清液和 200μL 试剂二，迅速混匀，于 450nm 处测定 3min 内吸光值变化，第 10s 吸光值记为 A3 ，第 190s 吸光值记为 A4 。△A 测定管=A4-A3。

注 意：

空白管只需测定一次。