产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术,专用于猪痘病毒(Swine Pox Virus, SPV)核酸的定性及定量检测。通过优化引物和探针设计,确保高灵敏度和特异性,可有效区分假阴性样本,适用于科研用途。
产品名称 | 猪痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Swine Poxvirus (SWPV) Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3319 |

试剂盒组成

PCR反应液:含预混PCR缓冲液、dNTPs、热启动DNA聚合酶及荧光染料(如SYBR Green)。
引物混合液:针对猪痘病毒高度保守区域设计的特异性引物。
阳性对照(1×10^8 拷贝/μL):无传染性的DNA片段,需单独存放避免污染。
阴性对照:无模板核酸的缓冲液,用于监测交叉污染。
核酸释放剂(试用装):支持20次样本核酸释放,兼容常规提取方法。
使用手册:含详细操作流程及数据分析方法。
操作步骤

样本制备
使用核酸提取试剂盒或本试剂盒提供的核酸释放剂制备待测DNA,建议浓度≥10 ng/μL。
标准曲线制备(定量检测需选做)
将阳性对照按10倍梯度稀释(10^2–10^7 拷贝/μL),每个浓度设3复孔。
PCR反应体系配制(20 μL体系为例)
依次加入PCR反应液10 μL、引物混合液2 μL、模板DNA 2 μL、超纯水补足至20 μL。
扩增程序设置
预变性:95℃ 5分钟;循环阶段(40次):95℃ 15秒→60℃ 30秒(采集荧光信号)。
数据分析
通过阈值循环数(Ct值)计算病毒拷贝数,标准曲线R²应≥0.99。
注意事项

储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融;阳性对照需单独存放。
防污染措施:操作分区进行(试剂配制区、样本处理区、扩增区),使用带滤芯枪头。
适用范围:仅限科研,不可用于临床诊断。
技术参数

灵敏度:最低检测限10拷贝/μL。
特异性:不与常见猪源病原体(如PPV、PRRSV)发生交叉反应。
线性范围:10^2–10^7 拷贝/μL(定量检测)。
常见问题
若扩增曲线异常,检查模板纯度或引物降解情况。
无信号时,确认荧光通道设置与染料匹配(如FAM/SYBR Green)。
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关键字: 猪痘病毒;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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