斯氏普罗威登斯菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 斯氏普罗威登斯菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Providencia stuartii Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3430 |
产品概述
本试剂盒为斯氏普罗威登斯菌（Providencia stuarti）染料法荧光定量PCR检测专用，适用于科研领域（不可用于临床诊断）。采用SYBR Green染料技术，通过特异性引物靶向斯氏普罗威登斯菌保守基因区域，实现高灵敏度、高特异性的核酸定量检测，线性范围覆盖至少5个数量级。
产品组分
| 成分 | 规格 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |
| 斯氏普罗威登斯菌qPCR引物混合液 | 100 μL |
| 超纯水 | 1 mL（用于稀释） |
| 阳性对照（1×10^6拷贝/μL）| 50 μL（可选） |
| 使用手册 | 1份 |
技术参数
检测类型：定性/定量检测（定量线性范围≥5个数量级）。
反应体系：20 μL/次，总次数50次。
扩增产物长度：约200 bp（需使用1.5%-2.0%琼脂糖凝胶验证）。
灵敏度：可检测低至100拷贝/反应的模板。
特异性：引物针对斯氏普罗威登斯菌专属序列设计，无交叉反应。
实验流程
样本制备
需设置N+2个提取反应（N=待测样本数，额外2个为阴阳性对照）。
阳性对照：10 μL阳性对照（1×10^6拷贝/μL）加水至样本体积。
阴性对照：使用超纯水。
推荐兼容市售细菌DNA提取试剂盒纯化样本。
PCR扩增
按20 μL体系配制反应液（含2×qPCR MagicMix、引物混合液及模板DNA）。
闭管操作，避免交叉污染。
结果分析
电泳验证：取5-10 μL扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳（1.5%-2.0%凝胶），阳性样本应出现200 bp条带。
阴性对照要求：若阴性对照出现扩增，表明污染，实验需重做。
注意事项
储存条件：组分需-20℃保存，避免反复冻融。引物干粉使用前需短暂离心并溶解于165 μL超纯水。
质量控制：每次实验必须包含阴阳性对照。
应用限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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